位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
一种小肽的多顺反子串联表达方法
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:中国生物工程杂志
  • 时间:0
  • 页码:45-47
  • 语言:中文
  • 分类:Q781[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,太原030001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30600226),山西省科技攻关项目(042035),山西省科技攻关资助项目(051100-8)
  • 相关项目:一种特异识别肿瘤血管及肿瘤细胞多肽的设计、克隆、表达及功能研究
中文摘要:

目的:构建蛇毒锯鳞蝰素(Echistatin,Ecs)多顺反子串联多拷贝基因。方法:以pMD18T—Ecs为模板,利用三对引物分别扩增Ecs基因,每个Ecs基因都有独立的起始和终止密码子,然后通过三个Ecs基因之间合适的酶切位点使之串联,再与表达载体pET30a连接后得到三拷贝重组质粒,在三个Ecs基因之间分别有SD序列和SD间隔序列。将质粒转化E.coli BL21(DE3)后IPTG诱导表达,18%SDS—PAGE和Western blot鉴定结果。结果:Ecs的表达量占全菌总蛋白的18%,实现了Ecs的串联表达。结论:Ecs多顺反子的串联表达为小分子蛋白的体外制备提供了一种全新的思路和方法。

英文摘要:

Objective: To construct a polycistron tandem repeated Echistatin (Ecs) Ecs genes with independent initiation and termination codon were ligated tandem through gene. Methods : Three restriction enzyme sites after amplified with 3 pairs of primers using pMD18T-Ecs as template. The polycistron Ecs gene was inserted into pET30a and expressed in E. coli BL21 ( DE3 ) with IPTG induction. The expression results were identified by 18% SDS-PAGE and Western blot. Results: The expression of Ecs polycistron was accomplished with 18% expression level of total protein determined by SDS-PAGE and Western blot. Conclusion: The successful expression of Ecs polycistron provided a new method for the preparation of low molecular weight protein.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959