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蟾酥灵诱导细胞内caspase-3活化特性荧光分析
  • ISSN号:1000-2618
  • 期刊名称:《深圳大学学报:理工版》
  • 时间:0
  • 分类:Q631[生物学—生物物理学]
  • 作者机构:[1]深圳大学光电子学研究所,光电子器件与系统(教育部/广东省)重点实验室,深圳518060, [2]华南师范大学激光生命科学研究所,激光生命科学教育部重点实验室,广州510631, [3]暨南大学第一附属医院,广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30670507,60378043,30470494)
中文摘要:

采用多光子激发荧光光谱和寿命成像显微技术,在单个活细胞内实时检测蟾酥灵(bufalin,Bu)诱导人类肺腺癌(ASTC-a-1)细胞死亡过程中caspase-3的活化特性.利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测蟾酥灵对人类肺腺癌细胞活性的抑制效应.蟾酥灵处理稳定表达FRET质粒SCAT3的人类肺腺癌后,在不同时间点检测单个活细胞中SCAT3的多光子激发荧光光谱及其供体ECFP的荧光寿命,从而检测bufa-lin诱导细胞凋亡过程中caspase-3活化特性.实验结果表明:蟾酥灵以浓度依赖性的方式显著地抑制人类肺腺癌细胞的生长;蟾酥灵处理细胞24h后,细胞内SCAT3未被切割,而蟾酥灵作用细胞48h后SCAT3被切割.说明caspase-3参与调控蟾酥灵诱导人类肺腺癌细胞凋亡的过程.

英文摘要:

Caspase-3 activation was analyzed inside single living cells during bufalin-induced human lung adenocarcinoma ( ASTC-a-1 ) cell apoptosis by using multi-photon excitation spectra and fluorescence lifetime imaging microscopy (FLIM). CCK-8 was used to assay the inhibition of bufalin on the ceils' viability. The dynamical emission spectra of SCAT3 which is a fluorescence resonance energy transfer (FRET) plasmid, and fluorescence lifetime of ECFP were performed inside single living cells, stably expressing SCAT3 after bufalin treatment. Compared with controls, SCAT3 did not change after 24 h, but was cleaved after 48 h, which were verified by the changes of fluorescence spectra of SCAT3 and fluorescence lifetime of ECFP. Our data shows that the cells' growth is significantly inhibited by bufalin in a dose-dependent manner; caspase-3 is involved in the bufalin-induced cell death.

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期刊信息
  • 《深圳大学学报:理工版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:深圳大学
  • 主办单位:深圳大学
  • 主编:阮双琛
  • 地址:深圳市南山区南海大道3688号深圳大学办公楼419室
  • 邮编:518060
  • 邮箱:journal@szu.edu.cn
  • 电话:0755-26732266
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2618
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1401/N
  • 邮发代号:46-206
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,荷兰文摘与引文数据库,英国科学文摘数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:3617