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基于整体材料的微流控芯片反相液相色谱-串联质谱平台用于蛋白质分析
  • ISSN号:1000-8713
  • 期刊名称:《色谱》
  • 时间:0
  • 分类:O658[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连116023, [2]中国科学院研究生院,北京100039
  • 相关基金:国家自然科学基金(20935004); 科技部基础研究计划(2007CB714503 2007CB914100)和科技部科技支撑计划(2008BAK41B02 2009BAK59B02)项目
中文摘要:

微流控芯片高效液相色谱-串联质谱系统具有高通量、高灵敏度等优点,已成为生物样品分析的热点领域之一。本文在玻璃芯片上以甲基丙烯酸十二酯(LMA)和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TMPTMA)为单体,制备了以聚丙烯酸酯整体材料为固定相的捕集柱和分离柱。通过在芯片通道末端连接细内径的毛细管作为芯片-质谱接口,并以常规的液相色谱泵和微阀控制流体,构建了芯片反相液相色谱-电喷雾串联质谱(RPLC-ESI-MS/MS)平台,并将其用于分析牛血清白蛋白(BSA)的酶解产物。经过3次平行分析,BSA的序列覆盖率分别为39.37%、37.89%和34.10%(相对标准偏差为7.3%)。采用不同批次制作的芯片构建RPLC-ESI-MS/MS平台,对BSA酶解产物进行分析,其序列覆盖率相当。上述结果表明,该平台具有灵敏度高和重现性好等优点,有望用于蛋白质样品的快速分离和高灵敏度鉴定。

英文摘要:

Due to the high throughput and high sensitivity,the hyphenation of microchip-based high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry has been paid much attention.In our recent work,with poly(lauryl methacrylate-co-trimethylolpropane trimethacrylate) monolithic materials prepared in microchannels as trap and separation columns,conventional micro-liquid chromatography pumps and valves for fluidic control,and a small-bore open-tube capillary attached to the outlet channel as chip-mass spectrometer(MS) interface,the microchip-based reversed-phase liquid chromatography-tandem mass spectrometry(RPLC-MS/MS) platform was established,and applied for the identification of proteins.By such platform,100 ng digest of bovine serum albumin(BSA) was successfully analyzed with the sequence coverages as 39.37%,37.89% and 34.10%(with the relative standard deviation(RSD) of 7.3%) in three runs,separately.To evaluate the chip-to-chip reproducibility,BSA was identified by such platform with the micsochips from different batches containing trap column,separation column and chip-MS interface.The obtained sequence coverage and the number of peptides identified were comparable.All these results showed high sensitivity and good reproducibility of such platform,demonstrating the great potential for rapid protein analysis.

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期刊信息
  • 《色谱》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院大连化学物理研究所
  • 主编:张玉奎
  • 地址:大连市中山路457号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:sepu@dicp.ac.cn
  • 电话:0411-84379021
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8713
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1185/O6
  • 邮发代号:8-43
  • 获奖情况:
  • 1998年获中国科学院科学出版基金择优支持(1998-2...,2001年获第四届中国科学院优秀期刊二等奖,2002年获第三届中国科协优秀期刊三等奖,连续多年被评为辽宁省一级期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26730