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猪繁殖与呼吸综合征病毒强/弱毒感染PAM细胞生物学特性比较分析
  • ISSN号:1674-6422
  • 期刊名称:中国动物传染病学报
  • 时间:2012
  • 页码:32-37
  • 分类:S858.282.659.7[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(U0931003,31100121);“863”计划项目(2011AA10A208);国际合作项目(2010DFB33920);中央科研院所公益性基础科研业务费项目(2011JB03);上海市重点基础研究项目(11JC1415200)
  • 相关项目:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒毒力增强的分子基础研究
中文摘要:

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome vires,PRRSV)强、弱毒株在PAM细胞上的增殖特性,本研究在体外分离培养了健康猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM),然后分别用高致病性PRRSV强毒HuN4株和弱毒疫苗HuN4-F112株感染PAM细胞,细胞病变观察和间接免疫荧光检测结果显示,二者在体外均可以感染PAM细胞,其中强毒HuN4株感染PAM细胞CPE较为明显。在两个毒株感染PAM细胞后12、24、36、48、60h分别收获病毒感染的细胞,利用抗PRRSVN蛋白单抗进行Western blot分析检测病毒核蛋白在不同时间表达量的变化,结果表明,强毒株在感染PAM细胞的早期,N蛋白合成表达量明显高于弱毒疫苗株,而弱毒疫苗株在感染Macr-145细胞早期。N蛋白的合成量则明显优于强毒株。比较HuN4株与HuN4-F112株在PAM细胞和Marc-145细胞的生长曲线,结果显示强、弱毒在PAM细胞和Marc-145细胞生长趋势存在明显差异,其中强毒HuN4株在PAM细胞上增殖能力明显强于弱毒株,而弱毒HuN4-F112株在Marc-145细胞上的增殖能力明显强于其在PAM细胞上的增殖能力,表明PRRSV强毒株对靶细胞PAM的感染能力较强,弱毒疫苗株对其感染能力相对较弱。本研究为深入了解PRRSV强毒株与弱毒疫苗株的致病性差异提供了理论依据。

英文摘要:

Abstract: To better understand the growth properties of high/low-virulent Porcine reproductive and respiratory syndrome viruses (PRRSVs), highly virulent strain HuN4 and attenuated vaccine strain HuN4-F112 were used to infect primary porcine alveolar macrophages (PAMs). The cytopathic effect (CPE) in HuN4 infected PAMs was more severe than in HuN4-F112 infected PAMs although both strains were able to infect PAMs as determined by the formation of CPE and immunofluorescence assay. The viruses were harvested at 12, 24, 36, 48 and 60 hours post infection in PAMs and then the amounts of N protein were examined in Western blot. The results showed that the early expression of N protein was significantly higher in highly virulent HuN4 strain than attenuated HuN4-F 112 strain. However, similar experiment in Marc-145 cells yielded opposite conclusion. These results suggested that the cell tropism and replication ability of PRRSV have changed during repeated passages in continuous cell line Marc-145. The present study provided useful informationfor further investigation into the relationship between the virulence and growth properties of highly virulent and attenuated PRRSV strains.

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期刊信息
  • 《中国动物传染病学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院上海兽医研究所
  • 主编:童光志
  • 地址:上海市闵行区紫月路518号
  • 邮编:200241
  • 邮箱:bianjibu@shrri.ac.cn
  • 电话:021-34293142
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-6422
  • 国内统一刊号:ISSN:31-2031/S
  • 邮发代号:4-748
  • 获奖情况:
  • 第二届全国畜牧兽医优秀期刊二等奖,首届《CAJ-CD规范》执行优秀奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:1517