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大豆GmGBP1基因的原核表达及重组蛋白纯化
  • ISSN号:1000-9841
  • 期刊名称:《大豆科学》
  • 时间:0
  • 分类:S565.1[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]东北农业大学大豆生物学教育部重点实验室,东北农业大学农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室,黑龙江哈尔滨150030
  • 相关基金:国家自然科学基金(31101169,30671318,31271748); 转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08004-005); 黑龙江省教育厅大豆分子设计团队项目; 黑龙江省教育厅省高校青年学术骨干项目; 东北农业大学博士基金
中文摘要:

将大豆中已克隆的一个新的SKIP基因(GmGBP1)构建到原核表达载体pGEX-6p-1上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,对其进行IPTG诱导。结果表明:在IPTG浓度为0.1 mmol.L-1,诱导时间为8 h,诱导温度为37℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为95 kDa,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用8 mol.L-1尿素对其进行溶解后经GST柱纯化,得到较好的纯化效果。

英文摘要:

A new SKIP homolog in soybean was constructed into prokaryotic expression vector pGEX-6p-1 and then transformed into E.coli BL21(DE3)to get the expression protein for further study.The result indicated that an 95 kDa recombinant protein was expressed with the treatment of 0.1 mmol·L-1IPTG for 8 h at 37℃,the recombinant protein was confirmed to mainly existed in inclusion body form by SDS-PAGE.The high-quality recombinant protein was obtained through GST column purification after the inclusion body was dissolved with 8 mol·L-1 urea.

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期刊论文 14 获奖 1 专利 1 著作 1
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期刊信息
  • 《大豆科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:黑龙江农业科学院
  • 主办单位:黑龙江省农业科学院编辑出版中心
  • 主编:刘忠堂
  • 地址:哈尔滨市南岗区学府路368号
  • 邮编:150086
  • 邮箱:dadoukx@sina.com
  • 电话:0451-86668735
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-9841
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1227/S
  • 邮发代号:14-95
  • 获奖情况:
  • 1988年获黑龙江优秀期刊奖,1996年获黑龙江省科技情报二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:12334