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通过RACE技术构建铁皮石斛叶mRNA的cDNA PCR文库
  • ISSN号:1001-0009
  • 期刊名称:《北方园艺》
  • 时间:0
  • 分类:R931.71[医药卫生—生药学;医药卫生—药学]
  • 作者机构:[1]西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(31271302).
中文摘要:

基于RACE技术,以铁皮石斛叶片总RNA为起始材料,通过逆转录和末端转移构建出两端含有特定序列的cDNA。然后以连接有特定序列的引物进行cDNA的PCR扩增,从而构建出mRNA的cDNA PCR文库。结果表明:cDNAPCR文库的PCR效果明显高于逆转录产物的PCR效果,该方法构建的cDNA PCR文库能使cDNA放大100倍以上;以5pg的总RNA为起始材料构建cDNA PCR文库仍可得到良好的PCR扩增效果;该研究的cDNAPCR文库构建方法费用较低,操作简单,为克隆微量表达的基因提供了技术基础。

英文摘要:

Based on RACE technique,total RNA from Dendrobium candidum leaves was subjected to reverse transcription and terminal deoxynucleotidyl transfer resulting the cDNA which contained the specific sequences in two ends. The obtained cDNA with the specific sequences was amplified using PCR with primers which matched the specific sequencesto establish eDNA PCR library. The results showed that PCR amplification of the cDNA PCR library was more efficient significantly than that of eDNA. The quantity of cDNA was magnified more than one hundred times by the constructed eDNA PCR library. By the eDNA PCR library constructed using 5 pg total RNA as material, the satisfactory PCR amplification results can be obtained. This construction method of the eDNA PCR library was time and labor saving. This method would provided the technical basis for cloning genes of low expression.

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期刊信息
  • 《北方园艺》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:黑龙江省农科院
  • 主办单位:黑龙江省园艺学会 黑龙江省农业科学院
  • 主编:毕洪文
  • 地址:哈尔滨市南岗区学府路368号
  • 邮编:150086
  • 邮箱:bfyybjb@163.com
  • 电话:0451-86674276
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-0009
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1247/S
  • 邮发代号:14-150
  • 获奖情况:
  • 1996年获黑龙江省优秀期刊奖(二等),2000年获黑龙江省优秀期刊奖,2002年获全国优秀农业期刊奖,2005年获首届黑龙江省出版精品工程提名奖,2009年获中国北方优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:36972