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舞毒蛾几丁质酶基因的真核表达与重组病毒的获得
  • ISSN号:2095-1353
  • 期刊名称:应用昆虫学报
  • 时间:2013
  • 页码:1211-1218
  • 分类:Q782[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]太原理工大学化学化工学院生物与制药工程系,太原030024
  • 相关基金:国家自然科学基金(31101490);山西省青年科技研究基金(2010021031-2);太原市科技项目(120164087).
  • 相关项目:Ⅰ型和Ⅱ型几丁质酶在舞毒蛾发育过程中的功能及其杀虫效应研究
中文摘要:

几丁质是昆虫外骨骼和围食膜的重要组成部分,鉴于几丁质酶在昆虫生长发育过程中发挥着举足轻重的作用,应用昆虫几丁质酶为探索新的生物防治害虫的方法提供了途径。本文分别根据苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒多角体蛋白基因序列和编码舞毒蛾Ⅰ型几丁质酶基因的开放阅读框设计引物,使用聚合酶链反应扩增出以上两个基因,全长分别为783 bp和1 737 bp。构建重组质粒pFastBac-LdCht和pFastBac-AcPH-LdCht,转化大肠杆菌DH10Bac后获得重组穿梭载体,通过脂质体介导转染Sf9细胞产生重组杆状病毒AcMNPV-AcPH--LdCht和AcMNPV-LdCht,分别用于表达蛋白和获得重组病毒。细胞成功表达出有活性的舞毒蛾几丁质酶,并在棉铃虫体内扩增得到重组病毒。研究为深入了解昆虫几丁质酶性质提供依据,并为应用重组病毒奠定基础。

英文摘要:

Chitin is an important part of exoskeletons and peritrophic membrane of insect. In view of chitinase playing a pivotal role in the process of insect development, application of insect chitinase provides a strategy for exploring new methods for biological control of pests. In this paper, based on Autographa californica nuclear polyhedrosis virus polyhedrin gene sequence and the open reading frame of I chitinase gene from Lymantria dispar couples of primers were designed to clone the above two genes, with total length of 783 bp and 1 737 bp, respectively. Recombinant plasmid pFastBac-LdCht and pFastBac-AcPH-LdCht were constructed and transformed into E. coli DH10Bac to form recombinant bacmids which then were transfected into Sf9 cells to produce recombinant baculovirus AcMNPV-AcPH--LdCht and AcMNPV-LdCht. They were used to express the protein and get recombinant virus respectively. Cells successfully expressed active chitinase and amplified recombinant viruses in the Helicoverpa armigera. This study provided the basis for in-depth understanding of the insect chitinase and a potential way for recombinant virus application.

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期刊信息
  • 《应用昆虫学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国昆虫学会 中国科学院动物研究所
  • 主编:戈峰
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院5号中科院动物所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:entom@ioz.ac.cn
  • 电话:010-64807137
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-1353
  • 国内统一刊号:ISSN:11-6020/Q
  • 邮发代号:2-151
  • 获奖情况:
  • 96、2000年获中科院《优秀期刊三等奖》,92年获中国科协《优秀学术期刊一等奖》,2001进入“中国期刊”方阵,“双百”期刊,排名第96位
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:3170