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针对晚期氧化蛋白产物的抗体制备与应用
  • ISSN号:1000-484X
  • 期刊名称:《中国免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R392.33[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]南方医科大学免疫学教研室,广州510515, [2]南方医科大学南方医院,广州510515
  • 相关基金:本文受NSFC-广东省联合基金资助(No.U0932002)
中文摘要:

目的:制备特异性识别晚期氧化蛋白产物(Advanced oxidation protein products,AOPP)的多克隆抗体,为研究AOPP的致病机理及与临床病情相关性提供有效工具。方法:用次氯酸氧化家兔血清白蛋白以获得AOPP-RSA,以此为免疫原免疫家兔,亲和层析纯化免疫血清,ELISA鉴定多克隆抗体的效价及特异性,Western blot检测慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血浆中AOPP,免疫组织化学方法检测肾组织中AOPP分布与定位。结果:获得效价达10“的抗AOPP免疫血清,纯化抗体可特异地与不同种属来源的氧化修饰白蛋白结合,而与正常白蛋白及糖基化蛋白终产物无交叉反应。该抗体可识别人血浆中的AOPP,可特异地与大鼠CKD模型及各种炎症性CKD患者肾组织成份反应。结论:成功制备了可与不同种属AOPP结合的特异性多克隆抗体,并首次用于检测存在于CKD患者血浆、肾组织及模型动物肾组织中的AOPP,为深入研究AOPP的病理作用及其在组织定位提供了有效工具。

英文摘要:

Objective:To prepare the polyclonal antibodies against advanced oxidation protein products (AOPP), and to provide an effective agent for research on the pathogenesis of AOPP and assess exaetly the relationship between AOPP and relative diseases. Methods: AOPP-rabbit serum albumin (AOPP-RSA) was prepared by treating RSA with hypochloric acid. The rabbit anti-AOPP-RSA polyclonal antibodies were generated and purified by affinity chrolnatogyaphy. The titers and the specificity of the antibodies were measured by ELISA. The plasma AOPP and the localization of AOPP in nephridial tissues of some patients with chronic kidney disease (CKD) were determined using rabbit anti- AOPP-RSA. Results:Titers of the antiboches were 10- 6. Purified antibedies reacted specifically with oxidized albumin from different genus, but could not react with normal albumin and glycosylated albumin. The high level of AOPP in plasma from CKD patients was confirmed by Western blot. The antibedies could be used to immunostain AOPP deposition in different regions of kidney lissues from both CKD patients and CKD rat models. Conclusion:We successfully generate rabbit anti-AOPP polyclonal antibedies with high titers and striking specificity. The presence of plasma AOPP and localizations of AOPP in kidney tissues of CKD patients can be demonstrated using the antibodies. The development of anti- AOPP polyclonal antibodies may provide a new tool to explore the pathogensis of AOPP and assess exaetly the relationship between AOPP and relative diseases.

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期刊信息
  • 《中国免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国免疫学会 吉林省医学期刊社
  • 主编:田志刚
  • 地址:长春市建政路971号
  • 邮编:130061
  • 邮箱:zhmizazh@126.com
  • 电话:0431-88925027
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-484X
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1126/R
  • 邮发代号:12-89
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊,2007年获吉林省新闻出版局期刊精品奖,2006年获中国科协精品期刊资助项目,2004年获首届北方八省优秀期刊奖,2003年中国免疫学杂志荣获第二届国家期刊奖(百种...,2001年中国免疫学杂志成为首批进入"中国期刊方阵"...,获1994年吉林省十佳期刊提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:20795