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百合无症病毒CP基因的克隆及其RNAi载体的构建
  • ISSN号:0513-353X
  • 期刊名称:园艺学报
  • 时间:0
  • 页码:885-890
  • 语言:中文
  • 分类:Q782[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]大连理工大学生命科学与技术学院,辽宁大连116023
  • 相关基金:国家自然科学基金“siRNA抑制百合无症病毒(LSV)表达的研究”(30771760)
  • 相关项目:siRNA抑制百合无症病毒(LSV)表达的研究
中文摘要:

为获得适合转化百合的双价RNAi表达载体,以感病百合叶片的总RNA为模板,分别扩增400bp左右的LSV和LMoVCP基因。通过重叠延伸PCR技术获得长约800bp的LSV-LMoV融合基因。利用Gateway技术,通过BP反应及LR反应将LSV-LMoV融合基因克隆到双元载体pH7GWIWG2(Ⅱ),成功构建了含2种病毒基因的RNAi表达载体pH7GWIWG2(Ⅱ)-LSV-LMoV。将构建好的双价表达载体导入农杆菌EHA105,PCR和测序表明所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致。

英文摘要:

In order to gain the RNA interference(RNAi) transformation vector of lily,two fragment genes about400 bp of LSV and LMoV were obtained from the total RNA of lily leaves infected.LSV-LMoV fusion gene was constructed by recombinant PCR technique.Using Gateway cloning technology,the RNAi transformation vector pH7GWIWG2(Ⅱ)was constructed by BP and LR recombination reactions.PCR and sequencing analysis confirmed that the pH7GWIWG2(Ⅱ)-LSV-LMoV vector,a binary vector containing two different virus genes,was obtained successfully.Virus susceptible lily was transformed with pH7GWIWG2(Ⅱ)-LSV-LMoV by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation.

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期刊信息
  • 《园艺学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国园艺学会
  • 主编:杜永臣
  • 地址:北京市中关村南大街12号
  • 邮编:100081
  • 邮箱:ivfyyxb@mail.caas.net.cn
  • 电话:010-68919523
  • 国际标准刊号:ISSN:0513-353X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1924/S
  • 邮发代号:82-471
  • 获奖情况:
  • 第一届全国优秀期刊奖,中国科协第三届优秀期刊奖,第二届国家期刊奖提名奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:43371