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东方山羊豆GoGID基因表达载体构建及紫花苜蓿转化
  • ISSN号:1007-0435
  • 期刊名称:《草地学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q943.2[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193, [2]俄罗斯瓦维洛夫全俄植物栽培研究所,圣彼得堡190000
  • 相关基金:国家自然科学基金(31101755);现代牧草产业技术体系(CARS-35-01);中国农业科学院科技创新工程(AsTIP-IAS10)资助
中文摘要:

根据已经克隆得到的东方山羊豆赤霉素受体(GoGID)基因,扩增编码区cDNA.以pB1121为基础载体,采用酶切连接法,构建植物超表达载体pBI121-GoGID.酶切鉴定表明:目的基因已经正确插入载体中,超表达载体构建成功.采用CaCl2冻融法将重组载体转入农杆菌菌株中.以叶片为外植体,采用农杆菌介导的愈伤组织培养法,转化紫花菖蓿(Medicage sativa),得到抗性苗.对载体携带的nptⅡ基因、GUS基因进行PCR检测均成阳性,表明目的基因已成功导入紫花苜蓿基因组中.同时对转基因植株进行Southern-blot及RT-PCR检测,并均得到目的条带.本研究为进一步分析GoGID基因对紫花苜蓿生物量影响奠定了基础.

英文摘要:

Based on the Galega orientalis Gibberellin Receptor gene (GoGID) sequence, a cDNA fragment was cloned. By the aid of the pBI121 vector, the plant expression vector pBI121-GoGID was constructed using digestion and ligation method. The recombinant vector was verified by enzyme digestion. The plasmid was then transferred to Agrobacterium tumefaciens GV3101 by CaCl2 freeze-thaw method. Transgenic plants were obtained through somatic embryogenesis from leaves as explants by A.tumefaciens-mediated transformation. The nptⅡ and GUS gene existed in plasmid were tested by PCR in the genome of transgenic plants and all had positive results, indicating that the target gene has bean transferred into plant. The transgenic plants were also tested by Southern-blot and RT-PCR. This study will pave the path for further study of the function of GoGID in alfalfa biomass improvement.

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期刊信息
  • 《草地学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国草原学会
  • 主编:王堃
  • 地址:北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学动科楼152室
  • 邮编:100193
  • 邮箱:cdxb@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733894 62732799
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-0435
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3362/S
  • 邮发代号:80-135
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13756