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8-(6-氨基己烷)-氨基-NADH的制备和表征
  • ISSN号:1009-606X
  • 期刊名称:过程工程学报
  • 时间:0
  • 页码:966-980
  • 语言:中文
  • 分类:Q554[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100190, [2]中国科学院研究生院,北京100049, [3]Department of Bioproducts and Biosystems Engineering, University of Minnesota, St Paul, MN 55108, USA
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(编号:20576135,20728607),国家高技术研究发展计划(863)基金资助项目(编号:2006AA022217);中国科学院知识创新基金资助项目(编号:KSCX2-YW-G-019)
  • 相关项目:生物化工与食品化工
中文摘要:

采用1,6-己二胺对烟酰胺辅酶(NADH)的腺嘌呤C8位点进行定点修饰,通过DEAE—Sepharose层析分离得到产物8-(6-氨基己烷)-氨基-NADH.经优化制备过程和分离条件,其收率可达60%.在pH2.2-8.0内系统考察了修饰产物的pH稳定性,结果表明在不同种类的缓冲液中,修饰后辅酶的稳定性均有显著提高,在pH6.5的柠檬酸盐和pH8.0的磷酸盐缓冲液中,半衰期分别延长11和5倍.通过利用乳酸脱氢酶(LDH)和谷氨酸脱氢酶(GDH)测定修饰前后辅酶的活性,发现相同反应条件下修饰后辅酶的反应速率分别是天然NADH的3.0-3.8倍(LDH)和1.3-1.4倍(GDH).

英文摘要:

8-(6-aminohexyl)-amino-NADH was successfully prepared by modifying NADH with 1,6-hexanediamine at the C8 position of adenine moiety. After 3-step synthesizing process, the product was purified on DEAE-Sepharose column with the final yield up to 60%. The stability of NH2(CH2)6NH-NADH in acid or neutral environment was studied and compared with the native NADH. The results showed that the modified NADH was more stable than the native one, particularly in the citric acid-sodium citrate buffer (pH 6.5) and phosphate buffer (pH 8.0), the half life of modified NADH increased 11.0 folds and 5.0 folds, respectively. Catalytic activity of the modified NADH was evaluated with lactate dehydrogenase (LDH) and glutamate dehydrogenase (GDH) systems. For LDH and GDH, the activity for NH2(CH2)6NH-NADH was 3.0-3.8 or 1.3-1.4 times higher than that of native NADH, respectively.

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期刊信息
  • 《过程工程学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院过程工程研究所
  • 主编:张锁江
  • 地址:北京市海淀区中关村北二街1号过程大厦
  • 邮编:100190
  • 邮箱:CJPE@HOME.IPE.AC.CN GCGC@HOME.IPE.AC.CN
  • 电话:010-62554658
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-606X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4541/TQ
  • 邮发代号:80-297
  • 获奖情况:
  • 国家中文核心期刊,中国科学院核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊,中国科学院优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:11515