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禽网状内皮组织增生症病毒p30蛋白的表达及检测
  • ISSN号:1674-6422
  • 期刊名称:《中国动物传染病学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.659.3[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医] Q7[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
  • 相关基金:国家自然科学基金资助(31001077);农业行业专项(201003012)
中文摘要:

根据禽网状内皮组织增生症病毒SNV株的前病毒基因组cDNA序列设计并合成1对引物,以pPB101质粒为模板,通过PCR扩增获得该病毒p30基因片段。将PCR产物克隆入表达载体pCold-HF中,构建的原核表达质粒pCold-p30转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导,p30蛋白呈现可溶性表达。用表达产物免疫6周龄BALB/c小鼠,制备p30抗体,经Westernblot和间接免疫荧光法检测,结果发现,原核表达的SNV株p30蛋白具有良好的免疫原性。

英文摘要:

In the study, p30 gene of Avian reticuloendotheliosis virus (REV) was amplified by PCR from provirus genomic cDNA clone of SNV strain. The p30 gene was then subcloned into the pCold-HF vector. The resulting recombinant plasmid (pCP30) was transformed into the competent cells BL21 (DE3). With induction of isopropylthio-13-D-galactoside (IPTG), soluble p30 protein was expressed in BL21 cells and visualized as a band of 72 kDa in SDS-PAGE. Six-week old BALB/c mice were immunized with the purified protein to prepare p30 antiserum. The reactivity of the antiserum was determined in Western blot and indirect immunofluorescent assay. The availability of p30 antiserum would benefit to develop diagnostic method for the detection of REV infection in chickens and waterfowls.

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期刊信息
  • 《中国动物传染病学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院上海兽医研究所
  • 主编:童光志
  • 地址:上海市闵行区紫月路518号
  • 邮编:200241
  • 邮箱:bianjibu@shrri.ac.cn
  • 电话:021-34293142
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-6422
  • 国内统一刊号:ISSN:31-2031/S
  • 邮发代号:4-748
  • 获奖情况:
  • 第二届全国畜牧兽医优秀期刊二等奖,首届《CAJ-CD规范》执行优秀奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:1517