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复合基因载体可安全高效传导大鼠骨髓间充质干细胞
  • ISSN号:1001-6325
  • 期刊名称:《基础医学与临床》
  • 时间:0
  • 分类:Q28[生物学—细胞生物学]
  • 作者机构:[1]中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程中心,北京100005, [2]浙江大学药学院药物制剂研究所,浙江杭州310058
  • 相关基金:国家自然科学基金(81101719);国家重大科学研究计划(201CB964901)
中文摘要:

目的 探讨精胺普鲁兰多糖多聚体(SP)与腺病毒载体(Adv)形成的复合基因载体(SP-Adv)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的传导效率及其安全性。方法 SP与腺病毒载体(Adv)室温混合孵育15 min形成SP-Adv;透射电镜观察SP-Adv的物理化学性质;双萤光素酶报告系统检测SP-Adv在MSCs中的传导效率;MTT实验评价SP-Adv的细胞毒性;碱性磷酸酶染色和油红O染色检测SP-Adv对MSCs成骨及成脂分化能力的影响。结果 SP-Adv粒径变大且原病毒纤突消失被水合层代替;SP-Adv对MSCs的基因传导效率显著高于未包裹的Adv(P〈0.001),且SPAdv对MSCs无明显的细胞毒性;MSCs的成骨细胞和成脂细胞分化实验证实SP-Adv对MSCs的分化能力无影响。结论 SP-Adv可以对MSCs进行高效的基因传导,且证实该传导在细胞水平具有安全性。

英文摘要:

Objective To explore the transgene efficiency and safety of combined vector of spernfine-pullulan poly- mer (SP) and adenovirus vector (Adv) on rat bone marrow derived MSCs (MSCs). Methods To combine vec- tors, Adv was incubated with SP at room temperature for 15 rain to form SP-Adv, and the morphology was observed by EM microscopy. Luciferase activity reflecting the transduction efficiency was determined by a luciferase assay system, and cell viability was determined using an MTT assay system. The osteogenic differentiation was detected by alkaline-phosphatase staining, and adipogenic differentiation was detected by Oil-Red-O staining. Results Adv was coated with SP polymer and the size of SP-Adv was bigger than uncoated Adv. SP-Adv showed significant- ly higher transgene expression than the uncoated Adv and did not affect cell viability of MSCs. SP-Advs did not im- pair the osteogenic nor adipogenic differentiation of MSCs. Conclusions SP-Adv can efficiently transduce mesen- chymal stem cells, and their safety is demonstrated in cell level.

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期刊信息
  • 《基础医学与临床》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:北京市科学技术协会
  • 主办单位:北京生理科学会
  • 主编:章静波
  • 地址:北京东单三条五号中国医学科学院基础医学研究所内
  • 邮编:100005
  • 邮箱:basic_clinic@vip.163.com
  • 电话:010-69156964 65273665
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-6325
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2652/R
  • 邮发代号:82-358
  • 获奖情况:
  • 1991年北京市优秀期刊称号,2004年中国自然科学核心期刊,2004年入选《中国科技期刊科技精品数据库》,2006-2008年中国科协精品科技期刊工程资助项目(C类)
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:15569