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拟南芥耐盐相关基因AtSTK原核表达载体的构建及表达
  • ISSN号:1000-7091
  • 期刊名称:《华北农学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]河北师范大学生命科学学院,河北石家庄050024, [2]河北师范大学汇华学院,河北石家庄050024
  • 相关基金:国家自然科学基金(30900104); 河北省自然科学基金(C2009000271)
中文摘要:

提取拟南芥总RNA,反转录获得cDNA后PCR扩增获得1 212 bp目的基因AtSTK。将该基因片段构建到PET-32a表达载体,转化大肠杆菌Rosetta菌,用IPTG进行诱导表达。该基因表达的最佳诱导条件为IPTG终浓度1mmol/L,诱导时间为4 h,此时融合蛋白表达量最高。该融合蛋白存在于包含体中,经包含体溶解、复性,最终纯化获得了AtSTK融合蛋白,为AtSTK蛋白的理化性质研究奠定了基础。

英文摘要:

Total RNA was extracted from Arabidopsis leaves.1 212 bp AtSTK gene was amplified by RT-PCR and constructed into the expression vector PET-32a.Then the recombinant plasmid was transformed into E.coli Rosetta.The optimal induction conditions for AtSTK gene expression were 1 mmol/L IPTG and 4 hours induction.Under these conditions,the expression level of the fusion protein was highest.It was found that the form of the fusion protein was inclusion body.So the inclusion body was treated by dissolving and renaturation.Finally,the purified AtSTK fusion protein was obtained.This work laid the foundation for the next study on the physical and chemical properties of AtSTK protein.

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期刊信息
  • 《华北农学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:河北省农林科学院
  • 主办单位:山西省农业科学院 山西省农学会 河南省农业科学院 河南省农学会 天津市农业科学院 天津市农学会等
  • 主编:王海波
  • 地址:石家庄市和平西路598号
  • 邮编:050051
  • 邮箱:hbnxb@163.com
  • 电话:0311-87652166
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-7091
  • 国内统一刊号:ISSN:13-1101/S
  • 邮发代号:18-10
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,全国综合性农业核心期刊,中国科学引文数据库核心期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:32962