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阵列纸芯片比色法检测碱性磷酸酶
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:TQ352.78[化学工程]
  • 作者机构:[1]生物医学分析化学教育部重点实验室,武汉大学化学与分子科学学院,武汉430072, [2]武汉大学中南医院检验科,武汉430071
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.21205089); 教育部高等学校博士学科点专项科研基金(No.20120141120036)资助项目
中文摘要:

采用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)显色体系,构建了阵列纸芯片比色检测碱性磷酸酶(ALP)的方法。首先,借助烘干处理方式在光刻法制备的阵列纸芯片微孔中固定显色试剂,然后加入ALP进行显色反应,最后,采用凝胶成像仪和普通照相机成像,读取显色强度(灰度值)进行比色检测。详细考察了显色条件对检测结果的影响,探讨了人血清白蛋白对ALP检测的增色效应,在最佳实验条件下,ALP检测的线性范围为1.5~20 U/L,检出限(3#)为0.78 U/L(n=18),比文献报道中纸芯片上检测ALP方法的检出限低约两个数量级。本方法成功用于实际血清样品检测,测定结果与临床值一致。在此基础上,构建了双色阵列纸芯片,通过颜色的变化实现了ALP的可视化半定量检测。

英文摘要:

A low-cost,simple and sensitive colorimetric detection method of alkaline phosphatase( ALP) has been developed on microfluidic paper-based analysis devices. In a typical colorimetric detection,5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt( BCIP) and nitro blue tetrazolium( NBT) were firstly added onto the circle array zones of paper devices. Then ALP solutions were spotted to the array zones to perform the colorimetric reaction. The color results were recorded by both Gel Documentation systems and a common camera,and analyzed with Quantity One software. All the reaction conditions were aptimized. Under the optimal conditions,the colorimetric intensity showed a linear correlation to the concentration of ALP in the range of 1. 5 to 20 U / L with the limit of detection( LOD) of 0. 78 U / L( 3σ),which was about two orders of magnitude lower than that of the reported method on μPADs. Besides,it could be applied in spiked real sample analysis with a satisfactory result. In addition,a dual-color array-based paper strip has been fabricated for the semiquantitative detection of ALP. The approximate activity of ALP could be simply distinguished by observing the color change with naked eyes.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455