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棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及其表型分析
  • ISSN号:1002-7807
  • 期刊名称:棉花学报
  • 时间:2012.1.15
  • 页码:62-70
  • 分类:S435.621[农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室,石河子大学,新疆石河子832003, [2]中国科学院微生物研究所,植物基因组学国家重点实验室,北京100101
  • 相关基金:国家自然科学基金(31160350); 农业部转基因专项(2009ZX08010-001B)
  • 相关项目:棉花黄萎病菌致病关键基因的克隆和功能分析
中文摘要:

以棉花强致病力黄萎病菌株V592为材料,利用农杆菌介导的T-DNA插入技术构建了一个含15000个转化子的突变体库,对突变体的生物学特性、致病力及T-DNA插入拷贝数进行研究,结果显示:(1)突变体的菌落形态分为菌核型、中间型、菌丝型和菌膜型,分别占92.12%,4.54%,3.19%和0.15%;(2)菌核型、中间型和菌丝型菌株,在菌落生长速度和孢子大小方面无明显差异;而在产孢量方面,菌核型普遍强于中间型和菌丝型;(3)致病性测定显示,菌核型的致病力普遍强于中间型和菌丝型;(4)Southern杂交显示,T-DNA单拷贝数插入的突变体比率约为70.99%,而菌核型的单插入率为80.00%,明显高于中间型(69.23%)和菌丝型(64.71%)。以上结果表明,农杆菌介导转化技术可用于棉花黄萎病菌突变体库的快速构建,突变体的菌落表型与其产孢能力、致病力及T-DNA插入拷贝数等之间存在一定的相关性。

英文摘要:

We constructed a mutant library by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT),containing 15000 mutants from a virulent defoliating V.dahliae Kleb.V592 isolated from cotton originating from Xinjiang Province,China.The biological characteristics,pathogenicity,and T-DNA insertion of some mutants were analyzed.(1) Mutant phenotypes were divided into four groups according to colonial phenotype,number of sclerotium,such as sclerotium type,intermediate type,hyphal type and velum type,which accounted for 92.12%,4.54%,3.19%,and 0.15%.(2) The sporulation abilities of sclerotial type mutants were generally stronger than that of intermediate and hyphal type mutants,while growth speed and spore size showed no distinct differences from the wild-type V592.(3) The pathogenicity of sclerotial type mutants was generally stronger than of intermediate and hyphal type mutants.(4) Southern blot analysis indicated that T-DNAs were inserted randomly into the V.dahliae genome,and about 70.99% of the 131 transformants were single copy.This indicates that Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation could be used to create mutagenesis in Verticillium dahliae,and the mutant phenotype influences pathogenicity,sporulation,and T-DNA insertion.

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期刊信息
  • 《棉花学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国农学会
  • 主编:杨子山
  • 地址:河南省安阳市文峰区黄河大道38号中棉所办公区
  • 邮编:455000
  • 邮箱:journal@cricaas.com.cn
  • 电话:0372-2525361/362/369
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-7807
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1163/S
  • 邮发代号:36-63
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:9815