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鸡整胚原位杂交RNA探针的制备
  • ISSN号:1005-930X
  • 期刊名称:《广西医科大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q522[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]广西医科大学附属口腔医院口腔颌面外科,南宁530021
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.31060167)
中文摘要:

目的:建立一种快速、简便、高效的鸡胚整胚原位杂交地高辛标记的RNA探针的制备方法。方法:应用RT-PCR方法从鸡胚总RNA中扩增目的片段,连接到PGM-T克隆载体上,分别利用PGM-T载体中的SP6和T7 RNA 聚合酶上的启动子,以线性化的DNA为模板体外转录成地高辛标记的正反义 RNA探针。结果:成功得到地高辛标记的 RNA 探针,探针在鸡整胚原位杂交中有杂交信号。结论:成功转录得到地高辛标记的正反义探针,为后续的以鸡胚为模型整胚原位杂交试验做好了探针的准备。

英文摘要:

Objective:To develop a fast,simple and efficient protocol for whole-mount in situ hybridization of chick embryos with digoxigenin(DIG)-Labeled RNA probe.Methods:The target fragment of gene was ob-tained by RT-PCR through total RNA of chicken,using the RNA polymerase promoter,based on linear DNA template in vitro transcribed into DIG-Labeled RNA probe.Results:Obtained the DIG-Labeled RNA probe and positive signals were viewed in chick embryos.Conclusion:The successful preparation of DIG-La-beled RNA probes lays an experimental foundation for whole-mount in situ hybridizatation of chick embry-os which be used as an animal mode.

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期刊信息
  • 《广西医科大学学报》
  • 北大核心期刊(2004版)
  • 主管单位:广西医科大学
  • 主办单位:广西医科大学
  • 主编:赵劲民
  • 地址:广西南宁市双拥路22号
  • 邮编:530021
  • 邮箱:gxykdxb@163.com
  • 电话:0771-5358454
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-930X
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1211/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 全国高校自然科学优秀学报,广西优秀科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版)
  • 被引量:21818