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蓝氏贾第鞭毛虫单克隆抗体的制备及鉴定
  • ISSN号:1000-7423
  • 期刊名称:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R382.213[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织热带病合作中心,科技部国家级热带病国际联合研究中心,上海200025, [2]安徽省血吸虫病防治研究所,合肥230061
  • 相关基金:国家公益性卫生行业科研专项(No.201502021);国家自然科学基金(No.81371841);上海市公共卫生第四轮三年行动计划(No.15GWZK0101,GWIV-29)
中文摘要:

目的 制备并鉴定蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫, Giardia lamblia)单克隆抗体(mAb)。方法 以贾第虫滋养体抗原免疫2只8周龄雌性BALB/c小鼠, 利用细胞融合技术建立抗贾第虫抗原杂交瘤细胞株并制备mAb。制备贾第虫滋养体可溶性抗原(STA)和排泄-分泌抗原(ESP), 采用免疫球蛋白及亚型检测试剂盒鉴定mAb的类型及亚型。蛋白质印迹(Western blotting)鉴定mAb对贾第虫滋养体STA和ESP的识别。采用ELISA检测mAb与贾第虫滋养体抗原反应性, 并检测与其他寄生虫抗原的交叉反应。结果 获得12株分泌贾第虫单克隆抗体细胞株(BB3、CE5、CC10、EG4、GC7、CC1、EF6、DB8、BG10、GH7、HC7和EB2), 均为IgG1亚型。其中EB2能识别贾第虫滋养体STA和ESP中相对分子质量分别为175 000和191 000的蛋白条带, 与大肠埃希菌(Escherichia coli)、猪蛔虫(Ascaris suum)、人芽囊原虫(Blastocystis hominis)、日本血吸虫(Schistosoma japonicum)虫卵、日本血吸虫成虫和卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)成虫抗原等均无交叉反应。结论 制备的贾第虫特异性mAb为IgG1亚型。

英文摘要:

Objective To prepare and identify the monoclonal antibodies (mAb) against Giardia lamblia.Methods Two BALB/c mice of 8 weeks were immunized with antigens extracted from G. lamblia trophozoites, based on which mAb was prepared with traditional hybridoma technology. mAb isotyping was performed using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with coatings by soluble trophozoites antigen (STA) and excretory-secretory protein (ESP) prepared from G. lamblia trophozoites. mAb recognition of STA and ESP was identified by Western blotting. ELISA was performed to detect mAb reactions with G. lamblia trophozoite antigen as well as its cross-reactions with antigens from other parasite species. Results Twelve mAb-secreting hybridoma cell lines were obtained, comprising BB3, CE5, CC10, EG4, GC7, CC1, EF6, DB8, BG10, GH7, HC7 and EB2, all producing the IgG1-subtype mAb. The EB2 mAb specifically recognized proteins with Mr of 175 000 and 191 000 from STA and ESP, respectively, with no cross-reactions to the antigen extracts from Escherichia coli, Ascaris suum, Blastocystis hominis, eggs and adult worms of Schistosoma japonicum, and adult worms of Paragonimus westermani. Conclusion The specific IgG1-type mAb for G. lamblia trophozoites has been prepared.

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期刊信息
  • 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
  • 主编:汤林华
  • 地址:上海市瑞金二路207号右楼3F
  • 邮编:200025
  • 邮箱:zgjsczz@vip.163.net
  • 电话:021-54562376
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-7423
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1248/R
  • 邮发代号:4-362
  • 获奖情况:
  • 1997年被中华预防医学会评为先进编辑部,2000年荣获中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,2001年荣获中华预防医学会2001年优秀期刊二等奖,2003年荣获2001-2002年中华预防医学会系列杂志优...,2009年获“百种中国杰出学术期刊”奖,2010年荣获上海市科技期刊审计优秀奖,2011年遴选为第二届“中国精品科技期刊”,获第三届“RCCSE中国权威学术期刊”,2013年荣获国家卫生计生委首届优秀期刊,2013年荣获第四届华东地区优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11792