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基于HEV中和表位的基因免疫诱导特异性抗体及中和作用研究
  • ISSN号:1671-6264
  • 期刊名称:《东南大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R-33[医药卫生] R512.6[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]东南大学医学院病原生物学与免疫学系,江苏南京210009
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30271212 30271231)
中文摘要:

目的:观察基于戊型肝炎病毒中和表位(p179)的基因免疫是否能在小鼠体内诱导具有中和作用的抗体应答。方法:构建含HEV中和表位p179编码基因的真核表达质粒pVAX-179,以肌肉注射法对BALB/c小鼠实施基因免疫,实验组每只小鼠给pVAX-179 100μg,并设立空质粒pVAX和HEV-p179蛋白两个对照组。定期采集小鼠血清,ELISA法检测其特异性抗HEV-IgG抗体及其亲合力;以基于PCR的体外中和实验检测抗体的中和活性。结果:pVAX-179质粒基因免疫诱导小鼠体内产生了特异性抗-HEV-IgG抗体,抗体水平于第10周达高峰,OD值为0.55±0.13,与空质粒pVAX组(0.15±0.07)比较差异有统计学意义(P〈0.001)。第6周实验组抗体亲合力(ED50为2.5 mol·L^-1)高于蛋白对照组(ED50为2.0 mol·L^-1),基因免疫促进了抗体亲合力的成熟;体外中和实验证实产生的特异性抗体能够阻止HEV感染人肝癌细胞7721,具有中和HEV的活性。结论:基于戊型肝炎病毒中和表位(p179)的基因疫苗pVAX-179能够在小鼠体内诱导产生具有中和作用的抗体应答。

英文摘要:

Objective:To investigate whether the DNA vaccine based on HEV neutralization epitope(s) HEV-p179 could induce neutralizing antibody response in mice.Methods:The neutralization epitope(s) HEV-p179-coding gene was subcloned into a eukaryotic expression vector pVAX to construct recombinant plasmid pVAX-179.BALB/c mice were immunized i.m.with 100 μg DNA of pVAX-p179 plasmid,mock DNA,and 1 μg protein of HEV-p179,respectively.Sera collected at the indicated times from two groups were determined the levels and avidity of specific anti-HEV IgG antibody by ELISA.The neutralizing activity of induced anti-HEV antibody was detected in a PCR-based cell culture neutralization assay.Results:Immunizations with pVAX-179 successfully induced anti-HEV specific antibody response and accelerated the avidity maturation of antibodies.The anti-HEV level reached the hightest values about 10 weeks after first vaccination.The avidity of antibodies from pVAX-179 immunized mice was higher than that from HEV-p179 protein immunized group.In addition,the post-immune sera obtained from pVAX-p179 vaccinated mice were found the protective neutralizing activity against HEV infection.Conclusion:These results indicate that the DNA vaccine based on HEV neutralization epitope(s)-HEV-p179 could induce neutralizing antibody response against HEV in mice.

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期刊信息
  • 《东南大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:东南大学
  • 主编:唐萌
  • 地址:南京市鼓楼区丁家桥87号
  • 邮编:210009
  • 邮箱:bjb@pub.seu.edu.cn
  • 电话:025-83272481
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-6264
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1647/R
  • 邮发代号:28-265
  • 获奖情况:
  • 全国优秀学报,铁道部优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8241