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多年生黑麦草高频再生体系的建立及农杆菌介导PEPC基因的转化
  • ISSN号:1007-0435
  • 期刊名称:草地学报
  • 时间:2012
  • 页码:747-752
  • 分类:Q943.2[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]中国农业大学农学与生物技术学院,北京100193
  • 相关基金:“十二五”国家科技支撑计划“优质多抗牧草新品种选育与良种繁育关键技术研究与示范”(2011BAD17B01); 国家自然科学基金项目(31171989); 中央高校基本科研业务专项(2009-2-06)资助
  • 相关项目:质膜型水通道蛋白基因LpPIP提高多年生黑麦草响应干旱胁迫作用机制研究
中文摘要:

以多年生黑麦草(Lolium perenne L.)成熟种子作为外植体,建立其高频再生体系,通过农杆菌介导法将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因转入,为多年生黑麦草的抗逆转基因工作奠定基础。结果表明:种子充分灭菌后在附加6.0mg·L^-1 2,4-D的培养基中诱导愈伤组织,诱导率可达61.33%。愈伤组织在2,4-D浓度减半的培养基上继代培养长势良好,分化培养基为MS培养基附加1.0mg·L^-16-BA,分化率最高达到61.33%,在1/2MS+0.5mg·L^-1 NAA培养基中进行生根培养,生根率达100%。以该再生体系为基础,将获得的愈伤组织作为外植体进行遗传转化,经筛选培养后得到再生植株,通过PCR及实时荧光定量(Real-Time)PCR验证表明PEPC基因已成功转入,转化率为8.67%。试验结果将为多年生黑麦草抗性品种的研究奠定基础。

英文摘要:

In order to establish a highly efficient regeneration and transformation system of perennial ryegrass(Lolium perenne L.),its mature seeds were used as explants.Result showed that the best induction rate was 61.33%.Callus differentiated after 2-3 generation.The optimum medium for callus differentiation was MS+6-BA at 1.0 mg·L^-1 with 61.33% regeneration rate.The best medium for rooting was 1/2 MS+NAA at 0.5 mg·L^-1 and the ratio of rooting was 100%.Based on this regeneration system,the embryonic callus cells were used for Agrobacterium-mediated transformation.Transformed tissues were regenerated with media containing hyg as a selective solvent.PCR and Real-Time PCR analysis of transformants showed that PEPC gene was successfully integrated into the genome of perennial ryegrass and transformation rate was 8.67%.

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期刊信息
  • 《草地学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国草原学会
  • 主编:王堃
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  • 邮编:100193
  • 邮箱:cdxb@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733894 62732799
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-0435
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3362/S
  • 邮发代号:80-135
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13756