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日本血吸虫22.6kDa膜相关蛋白Th1型表位的免疫学鉴定
  • ISSN号:1005-6661
  • 期刊名称:《中国血吸虫病防治杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R383.24[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]南京医科大学病原生物学系,南京210029, [2]浙江中医药大学病原生物学教研室
  • 相关基金:国家自然科学基金(30571630)
中文摘要:

目的鉴定日本血吸虫22.6 kDa膜蛋白(Sj22.6)的Th1型表位,为构建短肽疫苗奠定基础。方法采用合成肽Sj22.6-P4、无关肽(对照)及PBS免疫C57BL/6小鼠2次(间隔7 d),末次免疫后7~10 d取脾分离单个核细胞,用合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS刺激培养,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞的增殖效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其细胞培养上清中IFNγ-、IL-4及IL-2水平。运用流式细胞技术三色标记法检测经合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS免疫2次的C57BL/6小鼠脾淋巴细胞内的Th1、Th2细胞因子。结果合成肽Sj22.6-P4可刺激经该抗原肽免疫2次的C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖,与PBS组相比,增殖指数(SI)均〉2。与无关肽对照组相比,细胞培养上清中IL-2、IFN-γ分泌水平增高,其中IL-2分泌水平差异有统计学意义(P〈0.05),IFN-γ差异无统计学意义(P〉0.05),而IL-4分泌水平明显降低(P〈0.05)。合成肽Sj22.6-P4免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞中分泌IFN-γ细胞的百分比显著增高,分泌IL-4细胞的百分比显著降低(P均〈0.05)。结论合成肽Sj22.6-P4是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。

英文摘要:

Objective To identify the T cell epitope Sj22.6-P4 in 22.6 kDa antigen of Schistosoma japonicum as a Th1-type epitope.Methods The synthetic peptide Sj22.6-P4,synthetic control peptide or PBS were used to immunize C57BL/6 mice twice(seven days interval),respectively,and 7 days after the last vaccination,spleen mononuclear cells of the vaccinated mice were separated and stimulated with Sj22.6-P4,control peptide or PBS,respectively.The proliferation of spleen lymphocytes was detected by the 3H-thymidine assay,and the levels of IL-2,IFN-gamma and IL-4 in the cultural supernatant were detected by the ELISA assay.The spleen cells of vaccinated mice were separated for detecting the intracellular cytokines IFN-gamma and IL-4 by three-color flow cytometry.Results Compared with the control peptide or PBS groups,Sj22.6-P4 was able to effectively stimulate the lymphocyte proliferation(SI〉2),and the high-level secretions of IL-2(P〈0.05) and IFN-gamma,and low level of IL-4(P〈0.05) of spleen lymphocytes in the Sj22.6-P4-immunized mice.In CD4+T cells,the percentage of IFN-gamma-producing cells showed significantly higher while the proportion of IL-4-producing cells significantly lower in the Sj22.6-P4-immunized group,when compared with the control peptide-or PBS-immunized group(P〈0.05).Conclusion Sj22.6-P4 is a Th1-type epitope specific for C57BL/6 mice.

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期刊信息
  • 《中国血吸虫病防治杂志》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:江苏省血吸虫病防治研究所 中华预防医学会
  • 主编:周晓农
  • 地址:江苏省无锡市梅园
  • 邮编:214064
  • 邮箱:xfbjb@vip.163.com
  • 电话:0510-68781021 68781022
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-6661
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1374/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 第三届国家期刊奖提名奖,中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,卫生部首届医药卫生优秀期刊一等奖,第二届江苏期刊方阵优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8477