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E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白启动子的构建及活性测定
  • ISSN号:1674-9960
  • 期刊名称:《军事医学》
  • 时间:0
  • 分类:Q503[生物学—生物化学] Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京100038, [2]军事医学科学院生物工程研究所,北京100850
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(31071174,81272231); 北京科技新星资助项目(2011112)
中文摘要:

目的构建含有E-钙黏蛋白(cadherin)基因和N-钙黏蛋白基因启动子的荧光素酶报告基因载体,并检测E-钙黏蛋白启动子和N-钙黏蛋白启动子的活性。方法利用PCR技术从乳腺癌细胞ZR75-1基因组中扩增出E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白启动子片段,插入到荧光素酶报告基因载体p GL4-basic中,确定所扩增的DNA序列后,将其转染至乳腺癌细胞ZR75-1和肝癌细胞Hep G2中,检测启动子的活性。结果测序结果表明,扩增的E-钙黏蛋白启动子序列正确;荧光素酶活性实验表明,E-钙黏蛋白启动子和N-钙黏蛋白启动子在乳腺癌细胞ZR75-1和肝癌细胞Hep G2中表达都具有活性。结论成功构建了E-钙黏蛋白启动子和N-钙黏蛋白启动子报告基因表达载体,为进一步筛选调节E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白表达的转录因子提供了重要基础。

英文摘要:

Objective To clone E-cadherin and N-cadherin promoters and insert them into a luciferase reporter gene vector, and to characterize the promoter activity of E-cadherin and N-cadherin. Methods E-cadherin and N-cadherin pro- moter were cloned into pGIA-basie. The resulting plasmids were determined by DNA sequencing. The promoter activity was analyzed in breast cancer cell line ZR75-1 and hepatocareinoma cell line HepG2. Results DNA sequencing showed that the sequences of the cloned promoter regions were correct. Analysis of the reporter gene activity indicated that the E-cad- herin and N-cadherin promoters had the highest transcriptional activity in ZR75-1 and HepG2 cells. Conclusion The E- cadherin and N-cadherin promoter genes are cloned successfully, contributing much to screening transcription factors that regulate E-cadherin and N-cadherin expression.

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期刊信息
  • 《军事医学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:军事医学科学院
  • 主办单位:军事医学科学院
  • 主编:吴祖泽
  • 地址:北京市太平路27号
  • 邮编:100850
  • 邮箱:yuankan@bmi.ac.cn
  • 电话:010-66931131
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-9960
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5950/R
  • 邮发代号:82-757
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:2231