位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
宫颈癌相关新基因的筛选、克隆及鉴定
  • ISSN号:1671-8852
  • 期刊名称:武汉大学学报(医学版)
  • 时间:0
  • 页码:275-278
  • 语言:中文
  • 分类:R737.33[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室,武汉430071
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(编号:30250008);湖北省自然科学基金资助项目(编号:301130735)
  • 相关项目:宫颈癌差异表达新基因抑癌功能及机制的研究
中文摘要:

目的:筛选、克隆及鉴定宫颈癌相关基因——BLCAP。方法:利用基因芯片技术对1例原发性宫颈癌患者的癌组织及其癌旁正常组织进行分析;将在宫颈癌组织中表达显著降低的BLCAP基因克隆到pET-28(a)表达载体上,以构建原核表达重组质粒pET-28(a)-BLCAP,通过PCR、限制性内切酶酶切和DNA测序等技术鉴定阳性重组子。结果:通过基因芯片分析发现存在表达差异的原癌和抑癌基因共11条,其中表达降低最明显的是BLCAP基因。构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,即BLCAP基因共264bp,基因序列无改变,基因插入后阅读框(ORF)正确。结论:筛选出了在宫颈癌中表达显著降低的BLCAP基因并成功构建了pET-28(a)-BLCAP原核表达质粒,为表达BLCAP目的蛋白及研究该蛋白的性质奠定了基础。

英文摘要:

To screen, clone and identify cervical carcinoma associated BLCAP gene. Methods: A proto-oncogene and suppressor-tumor gene DNA microarray was utilized to analyze gene expression patterns from cervical carcinoma tissues and their adjacent tissues in a primary cervical carcinoma. Then BLCAP gene, which was down-regulated greatly, was cloned into pET- 28(a) vector to construct the prokaryotic expression plasmid pET-28(a)-BLCAP. The positive clone was identified by PCR method, restriction endoenzyme analysis and DNA sequencing. Results: All 11 genes were consistently upregulated or downregulated in DNA microarray, and the BLCAP gene was downregulated greatly. The recombinant expression plasimid was identified by PCR method, digested with restricted endoenzymes and DNA sequencing, and was in coincidence with the predicted result. Conclusion: It was very successful to find the BLCAP gene which is down-regulated greatly in cervical carcinoma and construct the prokaryotic expression plasmid pET-28(a)-BLCAP. It was the foundation to express and study the quality of BLCAP protein.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《武汉大学学报:医学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:武汉大学
  • 主编:刘经南
  • 地址:湖北武汉珞珈山
  • 邮编:430072
  • 邮箱:mjwhu@whu.edu.cn
  • 电话:027-68755966
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8852
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1677/R
  • 邮发代号:38-403
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物科学数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:9865