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新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用
  • ISSN号:1000-8713
  • 期刊名称:《色谱》
  • 时间:0
  • 分类:O658[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]安徽医科大学研究生学院,安徽合肥230032, [2]军事医学科学院放射与辐射医学研究所, [3]北京蛋白质组研究中心, [4]蛋白质组学国家重点实验室,北京102206
  • 相关基金:基金项目:国家重大科学计划项日(2013CB911204);国家最大科学仪器没备开发专项项目(2011YQ09000504);国家自然科学基金项目(21275005,21235001)
中文摘要:

采用原子转移自由基聚合法制备了亲水聚合物修饰的硅胶颗粒作为一种新型固定化酶载体,在实现蛋白酶高密度固定的同时,显著降低了载体材料非特异性吸附导致的样品损失、因此,该固定化酶材料兼具高酶解效和高回收率的特性。以标准蛋白质牛血清白赁白(BSA)为样本,使用该固定化酶1 min即可完成酶解,鉴定到肽段对BSA的氨基酸序列役盖牢可达90%以上。该固定化酶材料成功应用于酵母菌全蛋白质复杂样本的酶解,从3min酶解产物中鉴定到666个蛋白质,超过同样条件下溶液酶解12h的鉴定结果.

英文摘要:

Abstract: A new type of immobilized trypsin was prepared using hydrophilic polymer modified silica microparticles (HPMSM) synthesized by atom transfer radical polymerization (ATRP) as the substrate material. ATRP modification led to densely packed hydrophilic polymer chains grafted on the microparticles surface which resulted in largely increased trypsin loading amount and minimized the nonspecific adsorption of proteins and peptides. Therefore, ultra-fast and highly efficient protein digestion was achieved with minimized sample loss. For standard pro- tein bovine serum albumin ( BSA), 1 rain digestion led to the identification of 93 peptides, which covered 91% amino acid sequence of the protein. This immobilized tt~jpsin was further successfully applied to the digestion of complex protein samples from yeast and 666 proteins were identified after 3 min digestion, which exceeded the number of identified proteins after 12 1/ solution digestion.

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期刊信息
  • 《色谱》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院大连化学物理研究所
  • 主编:张玉奎
  • 地址:大连市中山路457号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:sepu@dicp.ac.cn
  • 电话:0411-84379021
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8713
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1185/O6
  • 邮发代号:8-43
  • 获奖情况:
  • 1998年获中国科学院科学出版基金择优支持(1998-2...,2001年获第四届中国科学院优秀期刊二等奖,2002年获第三届中国科协优秀期刊三等奖,连续多年被评为辽宁省一级期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26730