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西伯利亚蝗基因组DNA提取及RAPD分析条件的优化
  • ISSN号:2095-1353
  • 期刊名称:《应用昆虫学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q959.212.06[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]新疆师范大学生命与化学学院,乌鲁木齐830054, [2]新疆农业职业技术学院,昌吉州831130
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30460028);新疆维吾尔自治区高校科研资助项目(XJEDU2005123,XJEDU2004-S20).
中文摘要:

以西伯利亚蝗Gomphocerus sibiricus(L.)为研究材料,利用改良的SDS法提取高质量的DNA,分别测试了dNTP浓度、镁离子浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA的量等因素对反应结果的影响。通过各因子的组合比较,建立了西伯利亚蝗RAPD优化体系:25舻LPcR反应体系,10×bufier2.5μL;dNTP0.24mmol/L;MgCl2 2.0mmol/L;Taq DNA聚合酶1U:DNA模板45ng;引物30ng。扩增程序为:94℃预变性lmin45 s、94℃变性30 s、35℃退火1 min30 s、72℃延伸2 min,45个循环、72℃延伸10min。结果表明,利用优化的反应条件进行西伯利亚蝗基因组DNA分析,实验有着良好的重复性和稳定性。

英文摘要:

By using an improved SDS method, we obtained high qualified genomic DNA of C, omphocerus sibiricus (L.). The effects of several parameters (contents of dNTP, Mg^2+ , Taq DNA polymerase and template DNA) on amplification were examined. The optimal reaction system of RAPD of G. sibiricus was determined as followed: 0.24 mmol/L dNTP, 2.0 mmol/L Mg2. , 1.0 U Taq DNA polymerase, 45 ng template DNA and 30 ng primer in total 25 μL reaction volume. Modified thermal profile consisted of an initial denaturation step at 94℃ for 1 rain and 45 s, followed by 45 cycles of 94℃ for30 s, 35℃ 1 min and 30 s and 72℃ for 2 min, and a final exposure to 72℃ for 10 min.

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期刊信息
  • 《应用昆虫学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国昆虫学会 中国科学院动物研究所
  • 主编:戈峰
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院5号中科院动物所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:entom@ioz.ac.cn
  • 电话:010-64807137
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-1353
  • 国内统一刊号:ISSN:11-6020/Q
  • 邮发代号:2-151
  • 获奖情况:
  • 96、2000年获中科院《优秀期刊三等奖》,92年获中国科协《优秀学术期刊一等奖》,2001进入“中国期刊”方阵,“双百”期刊,排名第96位
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:3170