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重组大肠杆菌表达降氰酶的诱导条件优化
  • ISSN号:1674-568X
  • 期刊名称:基因组学与应用生物学
  • 时间:2014
  • 页码:737-743
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]广西大学化学化工学院,南宁530004
  • 相关基金:国家自然科学基金(51108098); 广西大学大学生实验技能和科技创新能力训练基金资助项目(SYJN20120321)共同资助
  • 相关项目:无机类氰化物生物降解途径及代谢调控研究
中文摘要:

采用积分光密度法对产碱杆菌(Alcaligenes sp.)降氰酶基因在大肠杆菌中的高效表达进行了诱导条件优化,以工程菌BL21(DE3)-pET28a-cdE的诱导表达条件进行优化,以提高目的蛋白的产量和活性。结果显示,重组菌表达降氰酶的最佳诱导条件为温度28℃,初始菌体浓度OD600值为0.6,IPTG浓度为0.8mmol/L,诱导时间12h。研究发现,诱导剂的添加浓度对外源蛋白的表达水平具有显著影响,使用终浓度为0.8mmol/L的IPTG,诱导表达12h,降氰酶蛋白收率达到143.27mg/L,比活力达到11560 U/mg。与不添加诱导剂相比,重组蛋白的收率和比活力分别提高了64倍和9倍。

英文摘要:

Cyanide-degrading enzyme from Alcaligenes sp. expressed in E. coli were optimized by using integral optical density method to increase the production and activity of the recombinant protein. The results showed that the cyanide-degrading enzyme could be expressed optimally by adding 0.8 mmol/L IPTG at an initial OD600 of 0.6and induced for 12 hours at 28℃. Further study found that the concentration of IPTG had a significant impact on the expression level of recombinant cyanide-degrading enzyme. The yield of recombinant protein and its specific activity were 143.27 mg/L and 11 560 U/mg after induced by 0.8 mmol/L IPTG for 12 hours, which were increased by64 times and 9 times than those without IPTG, respectively.

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期刊信息
  • 《基因组学与应用生物学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:广西大学
  • 主办单位:广西大学
  • 主编:朱玉贤
  • 地址:广西南宁市大学东路100号广西大学西校园《基因组学与应用生物学》编辑部111室
  • 邮编:530004
  • 邮箱:gab@hibio.org 571388455@qq.com
  • 电话:0771-3239102
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-568X
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1369/Q
  • 邮发代号:48-213
  • 获奖情况:
  • 全国优秀高校学校自然科学学报,教育部优秀科技期刊,广西优秀科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:4299