犬口服盐酸坦洛新控释片后血浆药物浓度Cmax小于10 ng·mL-1,需建立测定犬血浆中坦洛新的高灵敏度液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS).血浆样品加入内标苯海拉明,用正己烷-二氯甲烷(2∶ 1)萃取后,反相C18色谱柱分离,以甲醇-乙腈-甲酸铵(30∶ 40∶ 30,v/v/v)为流动相,流速为0.4 mL·min-1.选用大气压化学离子化源(APCI)三重四极杆串联质谱仪,以选择反应监测方式进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 409→228(坦洛新)和m/z 256→167(苯海拉明).坦洛新线性范围为0.02~50 ng·mL-1,定量下限为0.02 ng·mL-1.批内、批间精密度(RSD)均小于9.72%,准确度(RE)在-2.61%~8.82%.本方法灵敏度高,专属性强,用于犬口服盐酸坦洛新控释片后的药代动力学研究.