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云芝漆酶的分离纯化和理化性质及抗增殖活性
  • ISSN号:1005-9873
  • 期刊名称:《食用菌学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q513[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室,北京100193
  • 相关基金:科技部“十一五”支撑项目“京郊地区种养业废弃资源循环利用技术集成研究与示范”(编号:2007BAD89B07); 中国农业大学生物学理科基地能力提高项目(科研训练 J0730639)的部分研究内容
中文摘要:

采用DEAE-cellulose,CM-cellulose和Q-Sepharose离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析,从云芝(Coriolus versicolor)发酵液中纯化得到了一种漆酶,SDS-PAGE电泳检测其为单一蛋白,分子量为67 kDa,N-端部分氨基酸序列为GIGPVADLTITNAAV。该酶可以催化氧化多种底物,其中对ABTS[2,2,-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonate)]的催化作用最强。最适反应条件为40℃,pH 5.0,其活性可以被Cu2+激活,被Fe3+、Hg2+、Fe2+抑制。该酶对HIV-1逆转录酶、乳腺癌MCF7细胞和肝癌HepG2细胞均具有抑制作用,其IC50分别为1.5μmol/L、2.3μmol/L和4.4μmol/L。

英文摘要:

A laccase from Coriolus versicolor was purified by ion exchange chromatography(DEAE-cellulose,CM-cellulose,Q-Sepharose) and gel filtration(Superdex 75) using fast protein liquid chromatography(FPLC).The enzyme is a monomeric protein with a molecular mass of 67 kDa based on SDS-PAGE and an N-terminal amino acid sequence of GIGPVADLTITNAAV.Purified laccase oxidized a range of phenolic and non-phenolic substrates,and exhibited highest activity on 2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonate)(ABTS).With ABTS as the substrate,the enzyme displayed pH and temperature optima of 5.0 and 40 ℃,respectively and was significantly inhibited by Fe3+、Hg2+、and Fe2+ but stimulated by Cu2+.C.versicolor laccase inhibited HIV-1 reverse transcriptase activity and the proliferation of MCF7 and HepG2 cancer cells with IC50 values of 1.5 μmol/L,2.3 μmol/L and 4.4 μmol/L,respectively.

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期刊信息
  • 《食用菌学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:上海市农业科学院
  • 主办单位:上海市农业科学院食用菌研究所 中国农学会
  • 主编:曹晖
  • 地址:上海奉贤区金齐路1000号上海市农业科学院食用菌研究所
  • 邮编:201403
  • 邮箱:xx8@saas.sh.cn
  • 电话:021-62209894
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-9873
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1683/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6226