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集胞藻ApcA和CpcA的体内生物重组研究
  • ISSN号:1671-4431
  • 期刊名称:《武汉理工大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q71[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学生命科学与技术学院,武汉430074, [2]武汉理工大学资源与环境工程学院,武汉430070, [3]华中农业大学生命科学技术学院,武汉430070
  • 相关基金:国家自然科学基金(30670489)
中文摘要:

利用聚合酶链式反应(PCR)克隆出集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803变藻蓝蛋白和藻蓝蛋白α亚基的编码基因apcA和cpcA,将脱辅基蛋白ApcA、CpcA分别与裂合酶CpeS1或CpcE/F以及血红素氧化酶HO1、胆绿素还原酶PcyA在大肠杆菌中共同表达。研究表明:通过大肠杆菌体内重组可以获得具有光学活性的重组色素蛋白PCB-ApcA和PCB-CpcA。吸收光谱、荧光光谱以及锌电泳均表明,藻蓝胆素与脱辅基蛋白形成了正确的共价连接。由此可知,利用大肠杆菌进行集胞藻藻蓝蛋白和变藻蓝蛋白α亚基的体内生物合成是可实现的。同时还对重组色素蛋白的摩尔消光系数和荧光量子产率进行了计算。

英文摘要:

Genes of α-subunit of allophycocyanin and phycocyanin(apcA and cpcA) from Synechocystis sp.PCC 6803 were cloned by PCR and expressed in E.coli.ApcA and CpcA were coexpressed in E.coli with heme oxygenase and 3Z-phycocyanobilin:ferredoxin oxidoreductase(HO1 and PcyA) and lyase(CpeS1 or CpcE/F) through in vivo reconstitution tests.All results from SDS-PAGE of Zn2+-induced fluorescence,absorption and fluorescence spectra showed that ApcA and CpcA could bind covalently phycocyanobilin(PCB) in E.coli and in vivo biosynthesis of α-subunit of phycocyanin and allophycocyanin from Synechocystis sp.PCC 6803 was practicable.Molar extinction coefficient and fluorescence quantum yield of reconstitution chromoproteins were calculated in the paper.

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期刊信息
  • 《武汉理工大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国教育部
  • 主办单位:武汉理工大学
  • 主编:周祖德
  • 地址:武昌珞狮路122号
  • 邮编:430070
  • 邮箱:whlgdxxb@whut.edu.cn
  • 电话:027-87651953 87397739
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-4431
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1657/N
  • 邮发代号:38-41
  • 获奖情况:
  • 全国建材优秀科技期刊,湖北高校先进学报期刊编辑部,湖北科技期刊编辑学会先进集体
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国剑桥科学文摘,英国科学文摘数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘
  • 被引量:22658