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低浓度胰酶多次差速酶消纯化乳鼠雪旺细胞的实验研究
  • ISSN号:1671-8925
  • 期刊名称:《中华神经医学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R736.4[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]广东神经外科研究所,南方医科大学珠江医院神经外科,广东省脑功能修复与再生重点实验室,广州510282, [2]北京军区总医院神经外科,北京100700
  • 相关基金:国家自然科学基金(国家自然科学基金-广东省联合基金U0632008);国家基金面上项目(30270491、30772232);粤科基办(08、05/06-7005206);粤财教(258-A030201019)
中文摘要:

目的介绍一种新的简便有效的体外培养和纯化雪旺细胞(SCs)方法,以获取足够数量、高纯度的SCs。方法取新生3~5d的SD乳鼠坐骨神经和臂丛神经,用胶原酶消化后收集细胞进行原代培养,细胞接种浓度为3×10^5个/mL,在接种72h内用胰酶分步多次消化进行提纯。结果该方法与1.25g/L胰酶差速酶消提纯SCs相比.能更有效地将SCs和成纤维细胞分离,经免疫荧光染色显示,SCs的纯度能达到95%以上。结论本方法简便易掌握,可重复性高,能获得足够数量、高纯度的SCs供细胞移植研究。

英文摘要:

Objective To describe a simple and efficient method to obtain large quantities of highly purified Schwann cells (SCs). Methods SCs were isolated from the sciatic and brachial nerves of 3- to 5-day-old newborn SD rats by collagenase digestion. The isolated SCs were plated at the density of 3×10^5/mL for primary culture, several rounds of trypsin digestion were performed within 72 h to purify SCs. Results Compared with the purification using 1.25 g/L trypsin digestion in serial differential detachment procedures, our protocol allowed easier and more efficient separation of the SCs from the fibroblasts. Immunocytochemical staining showed that the purity of the SCs exceeded 95%. Conclusion The purification protocol of the SCs we established can be easily carried out and yields well reproducible results to obtain large quantities of highly purified SCs for transplantation studies.

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期刊信息
  • 《中华神经医学杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:广东省广州市工业大道中253号
  • 邮编:510282
  • 邮箱:Journal@126.com
  • 电话:020-61643273
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8925
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5354/R
  • 邮发代号:46-251
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:16608