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hTERT基因转染人神经干细胞向永生化细胞转变实验研究
  • ISSN号:1671-2897
  • 期刊名称:《中华神经外科疾病研究杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R329.24[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学新桥医院神经外科,重庆400037
  • 相关基金:国家自然科学基金重点资助项目(30130110)
中文摘要:

目的 明确外源性人端粒酶催化亚单位(hTERT)在人神经干细胞永生化过程中的作用。方法 利用构建了hTERT基因的逆转录病毒载体PLXSN转染人NSCs,G418筛选后,扩大增殖,稳定后观察其生物学特性,检测端粒酶活性,通过核型分析、裸鼠移植致瘤性观察来了解转染细胞特性。结果 hTERT基因转入培养的NSC后,端粒酶活性增强,细胞增殖加速,传代时间缩短,传代50代仍稳定增殖,核型分析正常,无致瘤性。结论 hTERT基因转染NSCs,能获得永生化细胞,其表型能得以正常维持,可以作为进一步研究的种子细胞。

英文摘要:

Objective To investigate the effect of human telomerase reverse transeriptase (hTERT) in the immortalization of human neural stem cells (NSCs). Methods Human NSCs were cultured and transfected with retrovirus vector PLXSN-hTERT encoding hTERT. Positive clones were selected by G418. Expression of hTERT mRNA and telomerase activity was detected in stable clone. Karyotype analysis and nude mice transplantation were enforced to investigate the biology features of transfected cells. Results After NSCs transfected with hTERT gene, the expression of telomerase activity became much stronger. Cell proliferating activity increased and population doubling time (PDT) decreased. Moreover, there were 46 chromosomes in hTERT transfected NSCs. No abnormal DNA ploidy could be found in those cells. And no tumorigenesis was found when those cells were transplanted into the nude mice subcutaneously. Conclusion NSCs can be immortalized by hTERT transfection, and the immortalized NSCs can be used as seed cells for further study.

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期刊信息
  • 《中华神经外科疾病研究杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第四军医大学
  • 主办单位:第四军医大学第一附属医院
  • 主编:章翔
  • 地址:西安市长乐西路127号
  • 邮编:710032
  • 邮箱:cjnsdr@fmmu.edu.cn
  • 电话:029-84775567
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-2897
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1384/R
  • 邮发代号:52-266
  • 获奖情况:
  • 陕西省2004/2005年度“优秀科技期刊”,西安地区2005年度军队院校优秀期刊“一等奖”,2006年度陕西省科技期刊审读评选中:编辑出版优秀奖“
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:10671