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人端粒酶逆转录酶启动子调节单纯疱疹病毒胸苷激酶和人白细胞介素12融合基因肿瘤细胞特异性表达载体的构建及意义
  • ISSN号:1001-9030
  • 期刊名称:《中华实验外科杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R737.14[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]解放军总医院泌尿外科,北京100853, [2]解放军军事医学科学院生物工程研究所
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30840078)
中文摘要:

目的构建由人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调节的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV—TK)和人白细胞介素12(hIL-12)融合基因表达载体。方法利用聚合酶链反应(PCR)分别扩增hTERT启动子基因、HSV—TK基因和hIL-12p70基因,并将其分别克隆至pShuttle载体上,合成pShuttle—hTERTp—HSV—TK—linker—IL一-12融合基因表达载体,并对所合成的载体酶切、测序检验。结果各基凶片段成功扩增,大小分别为1084、1173、1557bp,并成功联结至pShuttle载体上。对所构建新载体分别行酶切鉴定,各融合基因片段大小与预计大小相符,DNA序列测定结果显示,与目标序列完全一致,无突变发生。结论成功构建肿瘤特异性启动子调控的融合基因表达载体pShuttle—hTERTp—HSV—TK—linker—IL-12。

英文摘要:

Objective To construct the tumor cells specific expression vector of combination gene of herpes simplex virus thymidine kinase (HSV-TK) and human inlerleukin 12 (hIL-12) driven by human telomerase reverse transcriptase (hTERT) promotor for the further research. Methods hTERTp, HSV-TK and IL-12p70 genes were amplified by using PCR separately and cloned into the vector pShuttle to establish the combination geue expression vector as pShuttle-hTERTp-HSV-TK-linker-IL-12. Subsequently, the expression vector was identified by enzyme digestion and DNA sequencing. Results The hTERTp, HSV-TK and IL-12p70 genes, which were 1084, 1173 and 1557 bp respectively, were successfully cloned into the expression vector and identified to be correct by enzyme digestion and sequencing. Conclusion The pShuttle-hTERTp-HSV-TK-linker-IL-12 combination gene expression vector was successfully constructed as prediction.

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期刊信息
  • 《中华实验外科杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:武汉市武昌区东湖路165号
  • 邮编:430064
  • 邮箱:cjes@cma.org.cn
  • 电话:027-87893475
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-9030
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1213/R
  • 邮发代号:38-85
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:34996