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一种基于构件重组建立超大容量DNA文库的方法
  • ISSN号:1671-7627
  • 期刊名称:南京工业大学学报(自然科学版)
  • 时间:2012
  • 页码:106-110
  • 分类:Q816[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京210009, [2]青岛科技大学化学与分子工程学院,山东青岛266042
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金面上资助项目(31170758)
  • 相关项目:一种基于蛋白质二级结构模块重组建立基因文库的新方法
中文摘要:

设计固定长度的随机序列,并在随机序列的末端加上共用接头作为标准构件,利用共用接头之间的互补连接,用重聚PCR的方法将标准构件进行随机组合,得到1个序列多样化的DNA文库。重聚优化的条件为:随机序列质量浓度18 ng/μL,重聚PCR退火温度27.8℃,终止引物浓度为随机序列浓度的1/40。文中方法的建立克服了目前突变体文库建立方法中强烈依赖起始基因的弊端,可以开拓更为广阔的序列空间。

英文摘要:

A mutant DNA library was formed with the design of fixed length random sequence,the addition of the same linker sequence to its ends,the sequences acting as standard module to hybridize and link each other in reassembly PCR process,and DNA sequences were randomly reassembled into full-length,chimeric sequences.The concentration of random sequence was 18 ng/μL and the concentration of termination primer 1/40 of that of random sequence.The anneal temperature of PCR was 27.8 ℃.Under the optimum conditions,the obtained DNA sequence with wide space solved problems of methods established in the generating mutant library relied on starting sequence.

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期刊信息
  • 《南京工业大学学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:南京工业大学
  • 主编:陆小华
  • 地址:南京市浦口区浦珠南路30号
  • 邮编:211800
  • 邮箱:journal@njut.edu.cn
  • 电话:025-58139286
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7627
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1670/N
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵双效期刊,中国高校优秀科技期刊奖,江苏省优秀期刊,中国高校科技期刊研究会优秀网站
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6160