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组织特异性启动子SM22α逆转录病毒载体的构建和效率
  • ISSN号:1672-0741
  • 期刊名称:《华中科技大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q754[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科,武汉430030, [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科,武汉430030
  • 相关基金:国家杰出青年科学基金资助项目(No.30725019); 国家自然科学基金资助项目(No.30870641)
中文摘要:

目的克隆小鼠SM22α基因的启动子,检测启动子特异性及效率。方法构建重组慢病毒载体,提纯病毒并感染细胞。结果序列分析表明,PCR扩增片段包含有完整的启动子元件和重要的功能框,成功克隆SM22α启动子。获得含特异SM22α启动子的重组慢病毒,滴度为1×108TU/mL。重组病毒分别感染血管平滑肌细胞(VSMCs)与非血管平滑肌细胞(NSMCs)。与NSMCs相比,在VSMCs中荧光强度明显增高(P〈0.05);与巨细胞病毒(CMV)启动子相比,含SM22α启动子的病毒感染效率无明显差异(P〉0.05),但诱导绿色荧光蛋白表达强度约为CMV启动子的80%。结论 SM22α启动子具有高度的平滑肌细胞特异性;诱导蛋白表达的能力较强。

英文摘要:

Objective To clone SM22alpha gene promoter,and test its specificity and efficiency.Methods By using PCR technique,SM22alpha promoter was constructed.The viruses were purified and transfected into vascular smooth muscle cells(VSMCs).Results Sequencing analysis showed that the amplified fragment contained the complete promoter elements and the important function of box,and SM22alpha promoter was successfully cloned.The titer of recombinant lentiviruses was 1×108 TU/mL.As compared with non-smooth muscle cells(NSMCs),the fluorescence intensity in VSMCs was significantly increased(P0.05).There was no significant difference in the transfection efficiency between the SM22alpha promoter and CMV promoter.But the fluorescence intensity induced by SM22alpha promoter was only 80% of that induced by CMV promoter.Conclusion SM22alpha promoter of SMCs owns a high degree of specificity and has a strong ability to induce protein expression.

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期刊信息
  • 《华中科技大学学报:医学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:华中科技大学
  • 主编:陈建国
  • 地址:武汉航空路13号
  • 邮编:430030
  • 邮箱:zhengm@mail.tjmu.edu.cn
  • 电话:027-83692530
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-0741
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1678/R
  • 邮发代号:38-37
  • 获奖情况:
  • 1996年第二届全国优秀科技期刊二等奖,1999年全国高等学校优秀自然科学学报一等奖,1999年湖北省出版佳作奖、省优秀期刊,2006年湖北省优秀科技期刊,2) 2008年教育部第二届中国高校优秀科技期刊奖,2010年教育部第三届中国高校优秀科技期刊奖,2011年第七届湖北省医学优秀精品期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:10596