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荧光实时定量PCR检测尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF—I基因方法的建立及初步应用
  • ISSN号:0529-6579
  • 期刊名称:《中山大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q7[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室//水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广东广州510275, [2]惠州学院生命科学系,广东惠州516007, [3]上海海洋大学生命学院,上海200090
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30571425);广东省科技计划资助项目(2004A20105001);珠海市科技计划资助项目(PC20051054);惠州学院博士启动基金资助项目(C207.0201);广东省科技兴海资助项目
中文摘要:

为了准确分析尼罗罗非鱼生长激素(growth hormone,GH)、生长激素受体(growth hormone receptors,GHRs)和胰岛素样生长因子I(Insulin—like growth factor-I,IGF-I)在早期发育阶段的作用,实验设计了尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF—I基因的特异性引物,提取垂体或肝脏总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了GH、GHR、IGF-I基因荧光实时定量PCR检测方法。运用建立的荧光实时定量PCR检测了尼罗罗非鱼GH、GHR和IGF-I基因表达的发育性变化。结果表明在早期发育阶段,尼罗罗非鱼GH与IGF—I,GHR1与GHR2的mRNA表达存在一定的互补关系;GH的表达与GHRI的表达呈显著正相关,提示GH与IGF—I,GHR1与GHR2在尼罗罗非鱼早期发育的不同阶段起主导作用,且GH可能主要通过与GHR1的结合起作用。

英文摘要:

To analyze accurately the roles of growth hormone (GH), two growth hormone receptors (GHR1 and GHR2) and insulin-like growth factor-I (IGF-I) during early development of Nile tilapia Oreochromis niloticus, methods of real-time quantitative PCR to examine GH, GHR and IGF-I gene expression were established. Total RNA was extracted from tilapia pituitary or liver tissue and the fragments of target gene were amplified by RT-PCR with special primers. PCR product was cloned into pGEM-T Easy vector. The success of recombinant plasmid was identified by PCR amplified and restriction enzyme analysis. Variation of mRNA levels of GH, GHR1, GHR2 and IGF-I during early development of Nile tilapia was studied applying real-time quantitative PCR. The trends of GH and IGF-I expressions were compensatory, which was the same as that of GHR1 and GHR2. The expression of GH was significantly correlated with that of GHR1 instead of GHR2. The above results suggested that GH or IGF, GHR1 or GHR2 may play different roles during early development of Nile tilapia, furthermore, the actions of GH may mostly mediated through GHR1.

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期刊信息
  • 《中山大学学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:中山大学
  • 主编:王建华
  • 地址:广州市新港西路135号
  • 邮编:510275
  • 邮箱:xuebaozr@mail.sysn.edu.cn
  • 电话:020-84111990
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-6579
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1241/N
  • 邮发代号:46-15
  • 获奖情况:
  • 全国优秀高等学校自然科学学报及教育部优秀科技期...,广东省优秀科学技术期刊一等奖,《中文核心期刊要目总览》综合性科技类核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18509