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基于黄瓜花叶病毒基因组RNA2的外源基因表达载体研究
  • ISSN号:1672-9145
  • 期刊名称:《生物化学与生物物理学报:英文版》
  • 时间:0
  • 分类:Q812[生物学—生物工程]
  • 作者机构:浙江理工大学生命科学学院,杭州310018
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31470007)
中文摘要:

为了确定黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)基因组RNA2能否作为构建表达外源蛋白的载体,实验构建CMV的Fny株系(CMV-Fny)RNA2中2b基因缺失载体pCB301-F209Δ2b和携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因载体pCB301-F209Δ2b-gfp,并分别将含有质粒CMV-FnyΔ2b和CMVFnyΔ2b-gfp农杆菌混和物浸润接种寄主植物。结果表明:CMV-FnyΔ2b在本氏烟产生轻微花叶症状并且病毒基因组含量降低;在CMV-FnyΔ2b-gfp侵染植株叶片中有绿色荧光的产生;番茄丛矮病毒沉默抑制子p19加入有助于CMV-FnyΔ2b表达GFP;在RDR6含量减少的本氏烟RDR6i中,与对照接种植株相比,CMV-FnyΔ2b-gfp所产生的GFP增加。研究获得基于CMV基因组RNA2所构建的外源蛋白表达载体CMV-CMV-FnyΔ2b,并发现加入其它病毒基因沉默抑制子有利于GFP的表达。

英文摘要:

In order to verify whether Cucumber m osaic virus (CMY) genome RNA2 could serve as the vector to express exogenous protein, 2b gene deletion vector pCB301-F209△2b and pCB301-F209△2b- gfp carrying green fluorescent protein (GFP) in CMV Fny strain RNA2 were constructed in the experiments. The agrobacterium mixtures containing plasmids CMV-FnyA2b and CMY-Fny△2b gfp was respectively inoculated into the host plant. The results indicate that CMV-FnyA2b generated slight mosaic symptom in Nicotiana benthamiana and the level of viral genome reduced. Green fluorescence emerged in the plant leaves infected by CMV-Fny△2 b- gfp . The presence of gene silencing suppressor protein p 19 from Tomato bush stunt virus in the inoculum of CMV-Fny△2b- gfp contributed to GFP expression by CMV-Fny△2b. In N. benthamiana RDR6i with reduced RDR6 accumulation, GFP generated by CMY-Fny△2 b gfp increased, compared with the control plant. In this study, exogenous protein expression vector CMV- FnyA2b based on CMV genome RNA2 was gained, and it was found that the addition of other virus gene silencing suppressor contributed to GFP expression.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理学报:英文版》
  • 北大核心期刊(2004版)
  • 主管单位:
  • 主办单位:中国科学院上海生物化学研究所
  • 主编:
  • 地址:上海岳阳路319号
  • 邮编:200031
  • 邮箱:abbs@sibs.ac.cn
  • 电话:021-54920956 54920955
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-9145
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1940/Q
  • 邮发代号:4-210
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:5851