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正交设计优化缩叶藓属植物的ISSR-PCR反应体系
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:生物技术
  • 时间:0
  • 页码:152-156
  • 语言:中文
  • 分类:Q781[生物学—分子生物学] Q943.2[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]齐齐哈尔大学生命与科学工程学院,黑龙江齐齐哈尔161006, [2]上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234
  • 相关基金:国家自然科学基金项目("世界缩叶藓属植物的分子生物地理学与系统发育研究",No.30770141)资助
  • 相关项目:世界缩叶藓属植物的分子生物地理学与系统发育研究
中文摘要:

目的:建立缩叶藓属(Ptychomitrium)植物ISSR-PCR反应的最佳体系。方法:利用正交设计实验的方法,采用引物562,10号材料Ptychomitrium gardneri为模板对缩叶藓属植物的ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(Mg2+d、NTPs、引物、模板量、Taq酶量)在4个水平上进行体系优化。结果:确定了缩叶藓属(Ptychomitrium)植物ISSR-PCR反应的最佳体系(25μl)为:Mg2+浓度为3.2mmol/L、dNTPs浓度为0.96mmol/L、引物浓度为1.04μmol/L、模板量10ng、Taq酶量1.5U。利用该体系,采用引物564在16个材料中能有效扩增。结论:这一优化体系的建立为以后缩叶藓属植物的ISSR遗传多样性的分析奠定了基础。

英文摘要:

Objective: Develop the most suitable ISSR-PCR system for Ptychomitrum.Method: The orthogonal design was used to optimize inter-simple sequence repeat PCR(ISSR-PCR) amplification system on Ptychomitrum in five factors(Mg2+,dNTPs,primer,DNA template and Taq DNA polymerase) at four levels respectively.Result: The most suitable ISSR-PCR system for Ptychomitrum was established,namely 25μl reaction system containing 3.2mmol/L Mg2+,0.96mmol/L dNTPs,10ng DNA template,1.04μmol/L primer,and 1.5U Taq DNA polymerase.Using the optimized reaction,16 Ptychomitrum materials were easy amplified with primer 564.Conclusion:The result provided a standardizing program for the analysis of interspecies genetic diversity of Ptychomitrum.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
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  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503