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用诱导性多能干细胞进行临床治疗的安全考量
  • ISSN号:1004-0374
  • 期刊名称:《生命科学》
  • 时间:0
  • 分类:Q7[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]上海交通大学附属儿童医院,上海市儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,上海市200040, [2]卫生部医学胚胎与分子生物学重点实验室、上海市胚胎与生殖工程重点实验室,上海市200040
  • 相关基金:资助项目:国家自然科学基金(No.81271690),上海市糖尿病重点实验室开放课题(No.SHKLD-K-1201)
中文摘要:

目的研究慢病毒在感染细胞后,是否全部整合入染色体。方法用慢病毒载体的假病毒感染293T细胞后.抽提培养2d和10d的细胞基因组DNA。通过定量PCR检测细胞基因组中LTR拷贝数,计算出整合率。分别取病毒感染3d和11d的细胞,离心重悬后取部分细胞放在荧光显微镜下拍照,在蛋白水平上验证此结论。结果①慢病毒载体在宿主细胞基因组内的平均整合率(47±16)%(n=10);②细胞感染慢病毒后3d和11d的GFP照片也证实了慢病毒在宿主细胞基因组内部分整合。结论慢病毒载体的假病毒感染293T细胞后,仅有部分的载体骨架是整合人基因组中的,整合入293T细胞基因组中的外源基因能够较长时间稳定表达。

英文摘要:

Objective To study how much infected Lentiviral Vectors are integrated into the host cell genome. Methods The lentiviral pro-viral copy numbers in the infected 293T cells chro- mosome was determined by quantitative PCR analysis. The ratio of the integration on day 10 over day 2 infection was used to determine the integration rate. Moreover, day 11 and day 3 infection pictures were used to prove the conclusion. Results The integration rate on average was : 47% ±0. 16 (n = 10) ; The GFP pictures taken on day 3 and day 11 proved such a conclusion. Conclusion Only part of infected Lentiviral Vectors are integrated into the host cell genome, and the integrated trans- gene could relatively stable express its transgene.

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期刊信息
  • 《生命科学》
  • 北大核心期刊(2008版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:国家自然科学基金委员会生命科学部 中国科学院生命科学与生物技术局 中国科学院生命科学和医学学部 中国科学院上海生命科学研究院
  • 主编:王恩多
  • 地址:上海岳阳路319号31号楼B座403中国科学院上海文献情报中心
  • 邮编:200031
  • 邮箱:CBLS@SIBS.AC.CN
  • 电话:021-54922830
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-0374
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1600/Q
  • 邮发代号:4-628
  • 获奖情况:
  • 1996年获上海市优秀科技期刊评比一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版)
  • 被引量:9112