位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
中慢生型天山根瘤菌中MrtR蛋白的融合表达研究及鉴定
  • ISSN号:0253-9829
  • 期刊名称:土壤
  • 时间:0
  • 页码:658-661
  • 语言:中文
  • 分类:Q933[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]南京农业大学生命科学学院,农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京210095
  • 相关基金:国家杰出青年基金项目(30325004)和自然科学基金项目(30570011)资助.
  • 相关项目:群体感应在天山根瘤菌菌植互作过程中的调节作用
中文摘要:

通过PCR扩增出中慢生型天山根瘤菌中群体感应调控蛋白MrtR的基因片段,克隆至表达载体pALEX中,从而构建了原核表达质粒pALEX—mrtR。将pALEX—mrtR转化至大肠杆菌BL2/DE3菌株感受态细胞中,经1PTG诱导,表达出58kD的GST-MrtR融合蛋白。用纯化好的GST—MrtR制备多克隆抗体,经Westernblot检测,该血清可与目的蛋白发生特异性反应,证明其具有良好的免疫原性。MrtR融合蛋白的成功表达及其多克隆抗体的制备为进一步研究MrtR蛋白的功能奠定了基础。

英文摘要:

The LuxR-LuxI-type quorum sensing systems have been shown to play a key role for rhizobia to form nodules on their plant hosts. The protein MrtR in Mesorhizobium tianshanense is a Lux-type regulator and regulates the LuxI-type synthesis, MtrI, in the quorum sensing system Of M.tianshanense. The mrtR coding sequence was fused to the T7 promoter of bacteriophage T7 by PCR amplification, using M.tianshanense genomic DNA as template. The resulting PCR product was cloned into pALEX, resulting in co-expressed GST-MrtR plasmid pALEX-mrtR. The resulting plasmid pALEX-mrtR was transformed into Escherichia coli strain BL21/DE3. High quantity of soluble GST-MrtR was obtained when the recombinant E.coli strain was incubated at 37℃ with IPTG inducer. The protein was purified by GST affinity chromatography and tested by SDS-PAGE. The polyclonal antibody against MrtR was obtained. The ELISA titer of antiserum against MrtR was about 1 : 262000. Western blot analysis showed that the antiserum could bind to the expressed fusion protein specifically.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《土壤》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院南京土壤研究所
  • 主编:赵其国
  • 地址:南京市北京东路71号
  • 邮编:210008
  • 邮箱:soils@issas.ac.cn
  • 电话:025-86881237
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-9829
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1118/P
  • 邮发代号:80-667
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,中国科学引文数据库源刊,中国学术期刊综合评价数据库来源期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:25709