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利用Taq DNA聚合酶直接从双链RNA模板中扩增靶序列
  • ISSN号:0253-2654
  • 期刊名称:《微生物学通报》
  • 时间:0
  • 分类:Q781[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]湖州师范学院生命科学学院,湖州313000, [2]浙江理工大学生命科学学院,杭州310018
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30500270,No.30671361).
中文摘要:

利用TaqDNA聚合酶既具有DNA聚合酶活性又具有反转录酶活性的特点,探索了在TaqDNA聚合酶单独作用下以双链RNA为模板进行PCR反应的条件。结果表明靶序列长度为277bp、369bp、987bp时,均可直接进行PCR扩增;短片段序列扩增的退火温度在47.0℃、47.9℃、50.2℃、52.6℃、54.9℃、56.7℃条件下,均可有效扩增,而长片段序列扩增的退火温度在50.2℃、52.6℃、54.9℃、56.7℃条件下,也可扩增出相应的靶序列。这一结果提示利用TaqDNA聚合酶可以dsRNA为模板直接扩增目的片段,尤其是短片段的扩增。

英文摘要:

Taq DNA polymerase has the activities of DNA polymerase and RNA reverse transcriptase. This research used the Double-stranded RNAs were used as templates for direct PCR, making use of the characteristics of Taq DNA polymerase. PCR for target sequences of 277, 369 and 987 bp from dsRNA templates were performed directly with Taq DNA polymerase. When the sizes of target sequences were 277 bp and 369 bp, they were amplified with dsRNA templates on the denaturing temperatures of 47. 0℃, 47. 9℃, 50. 2℃, 52. 6℃, 54. 9℃, 56. 7℃ respectively, and when the size of target sequence was 987 bp, it was also amplified with dsRNA templates on the denaturing temperatures of 50. 2℃, 52. 6℃, 54. 9℃ and 56. 7℃ respectively. The results suggested that target sequences can be amplified with dsRNA templates only using Taq DNA polymerase alone and it is more effective for amplification of smaller sequences.

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期刊信息
  • 《微生物学通报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:赫荣乔
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路一号院3号中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:xuj@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807511
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2654
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1996/Q
  • 邮发代号:2-817
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科学技术协会优秀学术期刊三等奖,1992年国家科委中共中央宣传部新闻出版署“全国优...,2000年中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:29487