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绿竹SEP3-like蛋白表达纯化以及不同结构域互作研究
  • ISSN号:1007-7847
  • 期刊名称:《生命科学研究》
  • 时间:0
  • 分类:Q71[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:浙江农林大学理学院,中国浙江临安311300
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31270715);浙江农林大学人才启动基金项目(2012FR079)
中文摘要:

在双子叶植物中,SEPALLATA3(SEP3)参与生殖生长的很多方面,包括花分生组织和花器官的形成。但是在单子叶植物中,花器官形成的分子机制还不清楚。为了揭示单子叶植物中SEP3蛋白的结构以及聚合体的形成与生物学功能的关系,以单子叶植物绿竹Bambusa oldhami为材料,构建绿竹SEP3(BoSEP3)蛋白不同结构域原核表达载体,在大肠杆菌中进行重组蛋白诱导表达,获得不同结构域的可溶蛋白,通过镍柱及分子筛分离纯化表明,BoSEP3蛋白K结构域以四聚体形式存在;同时构建BoSEP3蛋白不同结构域的酵母表达载体,通过酵母双杂交系统检验BoSEP3蛋白同源互作表明,K结构域有参与形成多聚体的功能。实验提供了一套表达纯化BoSEP3蛋白以及检验蛋白质互作的有效方案,为开展BoSEP3蛋白功能和结构生物学研究奠定了基础。

英文摘要:

SEPALLATA3 (SEP3) protein plays important roles in many aspects of the reproductive growth in dicotyledonous plants, including formation of flower meristems and organs. However, the molecular mecha- nism of floral organ formation in monocotyledon plants is not very clear yet. To reveal the structural charac- teristics of SEP3 as well as its relationship between the potential polymer formation and biological functions, a series of experiments using the monocotyledon plant Bambusa oldhami as the material were performed. Different protein domains were constructed and soluble expressions were obtained in prokaryotic E. coil sys- tem. The target proteins were purified through one-step nickel-affinity approach. Gelfihration assay indicat- ed that K domain was involved in the tetrameric formation under the testing conditions. Furthermore, the in- volvement of the K domain in the polymer formation was verified by yeast two-hybrid system. Thus an effec- tive approach to express and purify Bantbusa oldhami SEP3 (BoSEP3) protein was established. Confirmation of BoSEP3 as a tetramer in vitro facilitates a functional and structural analysis in the future.

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期刊信息
  • 《生命科学研究》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:湖南师范大学
  • 主办单位:湖南师范大学
  • 主编:梁宋平
  • 地址:长沙湖南师范大学生命科学学院1号档127#
  • 邮编:410081
  • 邮箱:life@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872616
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7847
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1266/Q
  • 邮发代号:42-172
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:5334