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猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定
  • ISSN号:0578-1752
  • 期刊名称:《中国农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:S852.659.2[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30871859);国家科技支撑计划项目(2006BAD06A07);中央级公益性科研院所基本科研业务费(2008-07);兽医生物技术国家重点实验室基金(NKLVBP2008-07)
中文摘要:

【目的】猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原,其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白,起保护性抗原作用,对其进行抗原表位鉴定十分必要。【方法】本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单克隆抗体,通过原核表达系统对ORF2基因进行了截短表达,先行对Cap蛋白抗原表位进行宽幅定位,然后利用合成多肽对Cap抗原表位做精确扫描定位。【结果】5株单抗中有4株针对同一抗原表位,坐落在Cap蛋白N末端核定位信号区,经多肽扫描证实,核心序列为。^26RPWLVHPRHRY^36;另1株单抗(1D2)仅与重组Cap蛋白产生免疫活性反应,对4个分段截短表达的Cap蛋白无免疫活性反应,鉴于该单抗具有中和病毒活性,针对的可能是构象表位。【结论】本研究首次鉴定出位于Cap蛋白核定位信号区的一个抗原表位,为以后Cap蛋白功能及核定位机理的研究奠定基础。

英文摘要:

[Objective] Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an important causative agent of postweaning multisystemic syndrome in pigs and capsid protein (Cap) encoded by ORF2 as the main structural protein is involved in the host immune protective response, so it is very important to identify the antigenic epitopes of PCV2 Cap. [Method] In this study, five monoclonal antibodies (MAbs) against recombinant PCV2-ORF2 Cap expressed by baculovirus system were generated and preliminary epitopes region was localized using the five MAbs after expression of truncated fragments from ORF2 gene in Echerichia coli system. Subsequently, peptides were synthesized to further accurately identify epitopes on the Cap. [ Result ] Of the five MAbs, four MAbs were against the same core epitope (26RPWLVHPRHRy36) verified by peptides mapping, locating in nuclear localization signal region at the N terminal of Cap. Besides, another MAb (1D2) could not react with the four truncated fragments only to react with the whole recombinant Cap, and it may be a conformational epitope based on its neutralizing effect against PCV2. [Conclusion] It was concluded that an epitope located in nuclear localization signal region of Cap was firstly reported, which will provide a basis for further studies on the functions of Cap as well as on the mechanism of Cap localization into nuclear.

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期刊信息
  • 《中国农业科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院 中国农学会
  • 主编:万建民
  • 地址:北京中关村南大街12号中国农业科学院图书馆楼4101-4103室
  • 邮编:100081
  • 邮箱:zgnykx@caas.cn
  • 电话:010-82109808 82106279
  • 国际标准刊号:ISSN:0578-1752
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1328/S
  • 邮发代号:2-138
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双高”期刊,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:85620