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Rab GDP解离抑制因子的定位和表达
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]上海大学生命科学学院,上海200444, [2]上海大学系统生物技术研究所,上海200444, [3]上海大学通信与信息工程学院,上海200444
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.31070954;No.81271253)资助
中文摘要:

目的:构建含人GD11和GD12基因的真核表达载体进行定位和蛋白表达研究。方法:用PCR从U251细胞cDNA克隆GD11和GD12基因,构建真核表达载体pEGFP—N2-GD11和pEGFP—N2-GD12,转染HEK293T细胞。荧光显微镜观察GDII和GD12蛋白的细胞内定位,再通过SDS—PAGE和Western b1otting鉴定蛋白的表达。结果:成功克隆到1341bp和1335bp的人源GD11和GD12基因,并准确插入真核表达载体pEGFP—N2中,荧光观察这两个蛋白定位到细胞浆中,并能利用标签抗体检测到GD11和GD12的表达。结论:GD11和GD12能够定位到细胞浆,并能通过Western b1otting检测,为进一步研究GD11和GD12的功能奠定了基础。

英文摘要:

Objective: To study the localization and expression of Rab GDP dissociation inhibitor construct eukaryotic expression vector con- taining the human GDI1 and GDI2 gene. Method :GDI1 and GDI2 gene were amplified from U251 cell cDNA by PCR, and subeloned into eukaryotic expression vector pEGFP - N2. Recombinant plasmid were transfected into HEK293T cells. Localization of GDII and GDI2 were observed through fluorescence microscopy. SDS - PAGE and Western blotting were used to identify the expression of recombinant GDI1 and GDI2. Result:Human GDI1 gene fragment of 1 341 bp and GDI2 gene fragment of 1 335bp were obtained, and was subeloned into eukaryot- ic expression vector pEGFP - N2. GDI1 and GDI2 were found localized cytoplasm, and 76kDa recombinant GDI1 and GDI2 were success- fully expression in HEK293T cells. Conelusion:GDI1 and GDI2 localized to cytoplasm and can be detected by Western blotting,laid the foundation to further study the function of GDI1 and GDI2.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503