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新型中性植酸酶在大肠杆菌中的高效表达、纯化及酶学性质
  • ISSN号:1002-6630
  • 期刊名称:食品科学
  • 时间:2012.11.15
  • 页码:153-156
  • 分类:Q814[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]南京工业大学化学化工学院,江苏南京210009, [2]盐城工学院化学与生物工程学院,江苏盐城224051
  • 相关基金:国家自然科学青年科学基金项目(31101912); 江苏省自然科学基金面上项目(BK2011420); 江苏省普通高校自然科学研究项目(09KJB530011)
  • 相关项目:芽孢杆菌中性植酸酶热稳定性机理及分子改造研究
中文摘要:

运用基因工程技术,将克隆到的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061新型中性植酸酶基因(GenBank登录号为HM747163)构建到表达载体pET22b(+)上,并在E.coli BL21(DE3)中进行高效表达。电泳结果表明该酶分子质量约为42kD,目的蛋白占大肠杆菌可溶性蛋白30%左右。利用Ni-NTA琼脂糖凝胶进行亲和纯化,酶学性质研究表明,其最适温度为60℃,最适pH值为7.0,最大酶比活力为15U/mg。60℃时以植酸钠为底物的Km值为0.30mmol/L。

英文摘要:

A new neutral phytase gene(phyc) from Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061(GenBank: HM747163) was cloned into expression vector pET22b(+).The phytase was expressed in Escherichia coli BL21(DE3).The molecule weight of the phytase protein was about 42 kD determined by SDS-PAGE.The expressed phytase was about 30% of the total soluble protein of E.coli.The recombinant protein was purified by 6×His-Tagged Protein Purification Kit.Optimal pH value and temperature of the phytase were 7.0 and 60 ℃,respectively.Under the optimum conditions,the activity was 15 U/mg.The Km value of the phytase for hydrolysis of sodium phytate under 60 ℃ was 0.30 mmol/L.

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期刊信息
  • 《食品科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国商业联合会
  • 主办单位:北京市食品研究所
  • 主编:孙勇
  • 地址:北京西城区禄长街头条4号
  • 邮编:100050
  • 邮箱:foodsci@126.com
  • 电话:010-83155446-8006
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-6630
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2206/TS
  • 邮发代号:2-439
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,1986年原商业部重大成果三等奖,1997年国内贸易部优秀科技期刊三等奖,第三届中国出版政府奖提名奖,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国工程索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:115579