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水稻黑条矮缩病毒基因组S7编码的2个非结构蛋白在病株中的表达检测
  • ISSN号:1001-7216
  • 期刊名称:《中国水稻科学》
  • 时间:0
  • 分类:Q756[生物学—分子生物学] S435.111.49[农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004, [2]浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地/农业部植物保护与生物技术重点开放实验室/浙江省植物病毒重点开放实验室,浙江杭州310021
  • 相关基金:国家973计划资助项目(2010CB126203);浙江省自然科学基金资助项目(Y3090657).
中文摘要:

水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)基因组片段S7含有2个非重叠的阅读框,所编码的蛋白分别为p7a和p7b。根据RBSDVS7序列(EU111804)设计特异性引物分别扩增编码p7a和p7b蛋白的基冈片段,并亚克隆至原核表达载体pET32a(+)和pSBEq、上,再以大肠杆菌BL21(I)E3)pLysS或BL21(I)E3)pLysE为宿主菌进行高水平表达,利用纯化的蛋白免疫小鼠,制备了p7a和p7b蛋白的特异性抗血清。蛋白质印迹分析表明p7a和p7b蛋白均在水稻病株中表达,但p7a含量较为丰富,易于在病株中检测到,而p7b在病株中含量则很低;在病毒粒子中,两者均未检测到任何信号,表明两者均为RBSDV的非结构蛋白。

英文摘要:

The genome segment S7 of Rite black-streaked dwarf virus (RBSI)V) contains two non-overlapping major open reading frames (ORFs), which encoded two proteins, p7a and pTb, respectively. Based on the sequence of S7 (EUl11804), two pairs of ST-specific primers were designed and respectively used to amplify the fragments encoding the p7a and p7b proteins. The expected products were sub-cloned into the expression vector pET 32a( + ) or pSBET and expressed at high level in E. coli BL21 (DE3)pl.ysS or BL21 (DE3)pLysE, respectively. An antiserum specifically against p7a or p7b proteins was prepared using the purified expression proteins to immunize mice. The results of Western blot revealed that both p7a and p7b proteins were expressed in infected plants, and p7a protein was more abundant and easily detected than p7b protein. However, both have not been detected in the viral particles, indicating that both proteins encoded by RBSDV S7 were nonstructural proteins.

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期刊信息
  • 《中国水稻科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:农业部
  • 主办单位:中国水稻研究所
  • 主编:程式华
  • 地址:杭州市体育场路359号中国水稻研究所内
  • 邮编:310006
  • 邮箱:cjrs@263.net
  • 电话:0571-63370278
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-7216
  • 国内统一刊号:ISSN:33-1146/S
  • 邮发代号:32-94
  • 获奖情况:
  • 首届全国科技期刊评比二等奖,第二届全国优秀科技期刊评比三等奖,农业部浙江省优秀期刊,国家期刊奖百种重点期刊,百种中国杰出学术期刊,中国精品科技期刊,中国国际影响力优秀学术期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:17826