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甲酰基肽受体1对BV-2细胞迁移的影响及机制的体外研究
  • ISSN号:1000-5404
  • 期刊名称:《第三军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R322.81[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学] R329-33[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所脊柱外科,重庆400042, [2]第三军医大学新桥医院病理科,重庆400037
  • 相关基金:国家自然科学基金青年科学基金(81401016)
中文摘要:

目的探讨甲酰基肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)对BV-2细胞迁移的影响及潜在机制。方法免疫荧光染色检测BV-2细胞FPR1的表达,Transwell小室实验分别检测浓度为1、10、50、100、500 nmol/L的FPR1特异性激动剂(formylmethionyl-leucyl-phenylalanine,f MLP)对细胞迁移的影响,划痕实验及Transwell小室实验验证f MLP促进细胞迁移的作用可以被FPR1特异性阻断剂BocMLF所抑制。Western blot检测激动剂组、阻断剂组和阻断剂+激动剂组BV-2细胞经干预后其FPR1蛋白和磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular regulate kinase,p-ERK)蛋白表达量的变化。结果经免疫荧光染色结果显示,BV-2细胞表达FPR1,主要位于细胞膜表面。随着f MLP浓度的升高,Transwell迁移实验结果显示BV-2细胞的迁移能力明显增加(P〈0.05),呈现出明显的剂量依赖性。100 nmol/L及500 nmol/L激动剂组效果最明显,f MLP促进BV-2细胞迁移的最适浓度为100 nmol/L。划痕及Transwell小室实验结果显示5μmol/L的Boc-MLF可显著阻断上述现象(P〈0.05)。f MLP可以上调BV-2细胞中FPR1的表达(P〈0.05),并且显著活化胞内ERK信号通路,上调p-ERK蛋白的表达水平(P〈0.05),Boc-MLF又可显著抑制上述改变(P〈0.05)。结论 BV-2细胞表达FPR1,且FPR1在促进BV-2细胞迁移中具有重要作用。

英文摘要:

Objective To determine the effect of formyl peptide receptor 1( FPR1) on the migration of BV2 cells and investigate the underlying mechanism. Methods The expression of FPR1 receptor in BV-2cells was detected by immunofluorescence staining. Transwell assay was used to detect the effect of FPR1 receptor specific agonist,formylmethionyl-leucyl-phenylalanine( f MLP),at different concentrations( 1,10,50,100 and 500 nmol / L) on the alterations of cell migration,while the scratch test and Transwell assay were used to verify the role of f MLP in the promotion of cell migration whether can be inhibited by FPR1 specific antagonist,Boc-MLF,or not. The protein expression of FPR1 was detected by Western blotting in the BV-2cells stimulated with different concentrations of f MLP. After stimulated with 100 nmol / L f MLP and 5 μmol / L Boc-MLF,the expression of phospho-extracellular regulate kinase( p-ERK) in the cells was detected by Western blotting. Results Immunofluorescence staining indicated that FPR1 receptor was expressed in BV-2cells,mainly located in the cell membrane. With the increase of f MLP doses,Transwell assay showed that the migration of BV-2 cells was enhanced significantly( P〈0. 05) in a dose-dependent fashion. The 100 and500 nmol / L f MLP showed most obvious effect,while the optimal f MLP concentration to promote BV-2 cell migration was 100 nmol / L. The scratch test and Transwell assay verified that those above effects could be inhibited by 5 μmol / L Boc-MLF( P〈0. 05). The specific FPR1 agonist,f MLP up-regulated the FPR1 receptor expression in BV-2 cells( P〈0. 05),activated ERK signaling pathway,and increased p-ERK protein expression significantly( P〈0. 05). The FPR1 specific antagonist Boc-MLF inhibited the above changes significantly( P〈0. 05). Conclusion FPR1 receptor is expressed in the BV-2 cells,and FPR1 plays an important role in the promotion of BV-2 cells migration.

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期刊信息
  • 《第三军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学
  • 主编:钱桂生
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  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5404
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  • 邮发代号:78-91
  • 获奖情况:
  • 先后20余次获全国、全军、教育部和省、市优秀科技...,2003年、2005年两度被评为"国家期刊奖百种重点科...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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