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RanGTPase激活蛋白RanGAP在嗜热四膜虫细胞中的定位及功能
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:《中国生物化学与分子生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q952[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]山西大学生物技术研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室,太原030006
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.31471999,No.31072000)和教育部科学技术研究重点项目(No.201026)资助
中文摘要:

RanGTPase激活蛋白(RanGTPase-activating protein,RanGAP)和Ran相互作用,提高了RanGTPase水解GTP的效率.RanGAP参与细胞内核质运输、纺锤体组装、核膜重建和异染色质的组装.生物进化过程中,不同生物的RanGAP表现出结构和功能的多样性.本研究从嗜热四膜虫大核基因组中鉴定出1个保守的RanGTPase激活蛋白基因RanGAP(TTHERM_00766430).实时荧光定量PCR表明,RanGAP在四膜虫营养生长、饥饿和有性生殖过程中均有表达,且在有性生殖4~6h表达水平最高.免疫荧光定位表明,在营养生长期、饥饿期及有性生殖的早期,RanGAP定位于细胞质中;在有性生殖后期,RanGAP定位于凋亡的大核中.过表达RanGAP的细胞增殖速率下降,大核分裂和胞质缢缩异常,产生无大核细胞.敲减RanGAP的细胞大核形态异常,细胞增殖速率下降,无丝分裂受到抑制,进而产生无大核细胞.RanGAP的过表达或敲除分别引起四膜虫RAN1,RanBP1和RCC1基因的表达下调或上调.结果表明,RanGAP通过Ran信号通路调控了嗜热四膜虫无性生殖过程中大核的无丝分裂,并可能参与了有性生殖过程中亲本大核的凋亡.

英文摘要:

RanGTPase activating protein (RanGAP) interacts with Ran to increase the hydrolysis rate of GTPs bound to Ran proteins. Although diversified in different organisms, functionally conserved RanGAPs participate in the processes of nucleocytoplasmic transport, mitotic spindle formation, nuclear envelope assembly and heterochromatin assembly. In this study, we identified a RanGAP (TTHERM 00766430) from Tetrahymena thermophila, which expressed at the vegetative growth, starvation and conjugation conditions as determined by real-time PCR, particularly peaked at 4-6 hours during conjugation stage. HA-RanGAP was found to localize in the cytoplasm in various stages, and was detected in the apoptotic parental macronuclei in late conjugation stage. Either overexpression or knockdown of RanGAP inhibited cell proliferation, led to abnormal macronuclear amitosis and cytokinesis, and eventually produced a macronuclear cells. Meanwhile, RanGAP overexpression resulted in down-regulation of RAN1, RanBP1 and RCC1 in Tetrahymena, while RanGAP knockdown did the contrary. The results showed that RanGAP regulated the macronuclear amitosis and involved in the parental macronuclear apoptosis in Tetrahymena.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731