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表达IBDV AH1株VP2嵌合法氏囊素三肽基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及免疫功能分析
  • ISSN号:1673-4696
  • 期刊名称:《中国兽医科学》
  • 时间:0
  • 分类:S852.659.4[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014
  • 相关基金:国家重点研发计划项目(2016YFD0500800); 国家自然科学基金项目(31272537,31302070,31572504); 江苏省自然科学基金项目(BK20141381,BK20151366); 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(16)1052]
中文摘要:

为研究传染性法氏囊病(IBD)重组火鸡疱疹病毒(HVT)的构建策略,以HVT FC126基因组非必需区UL44-UL45为插入位点,构建带有大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸转移酶基因序列(gpt)标记的HVT转移载体质粒pUAB-gpt。然后构建表达IBDVAH1株VP2嵌合法氏囊素三肽(BS10)表达盒并克隆入pUAB-gpt,获得转移载体质粒pUAB-Pec-BS10-VP2-Egpt。将该转移载体与HVT DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过间接免疫荧光试验(IFA)、IBDV抗体夹心ELISA检测、Western-blotting分析,结果显示,获得了表达VP2基因的重组HVT病毒rHVT-Pec-BS10-VP2。将该重组病毒免疫1日龄SPF鸡,免疫后第14天,鸡群可以检测到IBDV抗体。免疫后第21天,脾淋巴细胞增殖活性反应显著。证明IBD重组火鸡疱疹病毒构建成功。

英文摘要:

Construction strategy and immune functions of recombinant herpesvirus of infectious bursal disease (IBD) were studied.Non essential region UL44-UL45 of the HVT FC126 genome was selected as insertion sites.Using the selection marker Eco-gpt(Xanthine-guanine phosphoribosyl transferase(gpt),plasmid pUAB-gpt was constructed.Then,BS10-VP2 expression cassette was constructed and cloned into the plasmid pUAB-gpt to obtain the transfer vector of turkey herpesvirus pUAB-Pec-BS10-VP2-Egpt.Finally,transfer vector and total DNA of HVT infected cells were cotransfected into chicken embryo fibroblasts (CEFs).The recombinant rHVT-Pec-BS10-VP2 expressing the VP2 gene of IBDV was identified by indirectimmunofluorescenceassay (IFA),IBDVsandwich ELISAand Western-blot.Inaddition,ther HVT-Pec-BS10-VP2 were used to immunize 1-day-old SPF chicken.Antibody titrations were detected on 14 day after immunization.Splenic lymphocyte proliferation activity was remarkable on 21 day after immunization.Theseresults demonstrate that the recombinant HVT expressing the VP2 protein of infectious bursal disease virus is proved successful.

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期刊信息
  • 《中国兽医科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 主编:殷宏
  • 地址:兰州市盐场堡徐家坪1号
  • 邮编:730046
  • 邮箱:zgsykx@zgsykx.com
  • 电话:0931-8310086 8342195
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4696
  • 国内统一刊号:ISSN:62-1192/S
  • 邮发代号:54-33
  • 获奖情况:
  • 2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6141