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牛乳过敏原β-乳球蛋白间接竞争ELISA检测方法的建立
  • ISSN号:1007-4333
  • 期刊名称:《中国农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:TS252.73[轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程;轻工技术与工程—食品科学与工程]
  • 作者机构:[1]中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30471224;30871817);“十一五”国家科技支撑项目(2006BAD04A06)
中文摘要:

检测牛乳中的主要过敏原β-乳球蛋白,利用β-乳球蛋白纯品免疫新西兰白兔,制得兔抗牛β-乳球蛋白的多克隆抗体,以β-乳球蛋白包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗、四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了牛乳中β-乳球蛋白的间接竞争酶联免疫检测法(ELISA)。确定了包被抗原质量浓度为0.5μg/mL,一抗最佳稀释度为1∶6 400,酶标二抗稀释度为1∶10 000。结果达到批内误差3.87%,批间误差6.51%;检测的线性范围为0.05~1.00μg/mL,标准曲线回归方程y=-1.930 2x-0.124 1,相关系数为0.994 5,说明所建立的方法灵敏度高,具有良好的准确性和重复性。

英文摘要:

β-lactoglobulin is the main allergen in cow milk and to detect it in the milk, an indirect competitive enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) was developed. A polyclonal antibody was prepared by immunizing New Zealand rabbits with β-lactoglobulin. Results showed that the optimal concentrations of the coating antigen, polyclonal antibody against β-lactoglobulin and horseradish peroxidase conjugated goat anti-rabbit IgG were 0.5 μg/mL, 1 : 6 400 and 1 : 10 000 respectively; The coefficients of variation of intra-and inter-assays were 3.87% and 6.51%. The standard curve of indirect competitive ELISA was also obtained with the regression equation as y = - 1. 930 2x - 0. 124 1 ( r^2 = 0.994 5) and the curve was linear within the range of 0.05- 1.00 μg/mL. Thus, this method has good sensitivity for the detection of β-lactoglobulin in cow milk.

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期刊信息
  • 《中国农业大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:中国农业大学
  • 主编:李保国
  • 地址:北京海淀区圆明园西路2号
  • 邮编:100094
  • 邮箱:xuebao@cau.edu.cn
  • 电话:010-62732619
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-4333
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3837/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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