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细粒棘球绦虫亲环蛋白基因的克隆重组表达和生物信息学分析
  • ISSN号:1005-6661
  • 期刊名称:《中国血吸虫病防治杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R383.33[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,上海200025, [2]青海省地方病预防控制所
  • 相关基金:国家自然科学基金(30872212); 国家重大科技专项(2012ZX10004-201)
中文摘要:

目的克隆表达细粒棘球绦虫亲环蛋白(EgCyP)基因,并对其进行生物信息学分析。方法从细粒棘球绦虫cD NA中扩增目的基因,克隆入表达载体pET28a,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),经异丙基βD硫代半乳糖苷诱导表达后,进行SDS PAGE和免疫印迹试验鉴定,并对其进行生物信息学分析。结果重组质粒pET28a EgCyP构建成功。SDS PAGE和免疫印迹试验结果显示,重组蛋白在E.coliBL21(DE3)中获得高效表达,重组蛋白EgCyP分子量约为22 kDa,可被细粒棘球绦虫感染犬血清识别。生物信息学分析显示该蛋白具有7个潜在的抗原表位。结论成功克隆出细粒棘球绦虫EgCyP基因并在E.coliBL21(DE3)中表达,为进一步研究其免疫原性奠定了基础。

英文摘要:

Objective To clone and express EgCyP gene of Echinococcus granulosus and analyze EgCyP using bioinformatics. Methods Total RNAS of adult E. granulosus was extracted and reversedly transcripted to cDNA. EgCyP gene was amplified from cDNA and inserted into vector pET28a. Recombinant plasmid pET28a-EgCyP was transformed into E. coli BL21 (DE3) for expres- sion under the induction of IPTG. The expressed product was identified by SDS-PAGE and Western blotting. EgCyP was analyzed by the bioinformatics software. Results The EgCyP gene was successfully amplified from cDNA of adult E. granulosus and a fu- sion protein was expressed in E .coli BL21 (DE3). The molecular weight of the expressed protein was about 22 kDa. The Western blotting indicated that the antigenicity of the protein was specific. The bioinformatics analysis revealed that there were 7 antigen ep- itopes in EgCyP. Conclusion EgCyP ofE. granulosus is cloned and expressed in E. coli BL21 (DE3) successfully, which might be the foundation for the further study of its immunogenicity.

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期刊信息
  • 《中国血吸虫病防治杂志》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:江苏省血吸虫病防治研究所 中华预防医学会
  • 主编:周晓农
  • 地址:江苏省无锡市梅园
  • 邮编:214064
  • 邮箱:xfbjb@vip.163.com
  • 电话:0510-68781021 68781022
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-6661
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1374/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 第三届国家期刊奖提名奖,中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,卫生部首届医药卫生优秀期刊一等奖,第二届江苏期刊方阵优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8477